產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Native Carbonic Anhydrase II (CA2) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-23 08:54:42瀏覽次數(shù):546
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Native Carbonic Anhydrase II (CA2) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白 | Native Carbonic Anhydrase II (CA2) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C 酶與激酶 腫瘤免疫 骨骼代謝 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:天然提取 宿主Human 亞細胞定位::細胞膜, 細胞質(zhì) 預測分子量:29kDa 實際分子量:29kDa(差異分析請參閱說明書) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:6.9 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關產(chǎn)品:
鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白Recombinant Methyltransferase Like Protein 21C (METTL21C)
鈣蛋白酶9(CAPN9)重組蛋白Recombinant Like Glycosyltransferase (LARGE)
鈣蛋白酶7(CAPN7)重組蛋白Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8)
鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 3 (PRKAg3)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
ELMOD2產(chǎn)品名稱: ELMOD2蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Phospho-FLG (Tyr766)產(chǎn)品名稱: 因子受體1(CD331)抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
UBQLNL產(chǎn)品名稱: 泛su樣蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
ART5產(chǎn)品名稱: 二磷suan苷核糖基轉(zhuǎn)移mei5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
KIAA1467產(chǎn)品名稱: KIAA1467蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
ZP2產(chǎn)品名稱: 卵透明帶糖蛋白2抗體交叉反應: Human
UACA產(chǎn)品名稱: 葡萄膜自身抗原Uaca抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
FKBP51產(chǎn)品名稱: 類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
VPS28產(chǎn)品名稱: 液泡蛋白分選蛋白28抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep
DEFB108B產(chǎn)品名稱: 防御suβ-108B/β-defensin 108B抗體交叉反應: Human
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白兔尿激mei型纖溶mei原激活物(uPA)ELISA試劑盒uPA兔尿激mei型纖溶mei原激活物elisa kitRabbit urokinase plasminogen activator,uPA ELISA Kit
兔內(nèi)皮型一氧化氮合成mei(eNOS)ELISA試劑盒eNOS兔內(nèi)皮型一氧化氮合成meiELISA試劑盒Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit
兔內(nèi)皮su(ET-1)ELISA試劑盒ET-1兔內(nèi)皮suelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit Endothelin-1,ET-1 ELISA Kit
兔腦鈉su(BNP)ELISA試劑盒BNP兔腦鈉suelisa檢測試劑盒Rabbit BNP ELISA Kit
兔末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒TCC C5b-9兔末端補體復合物C5b-9elisa kitRabbit terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit