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碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白

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更新時間:2023-03-23 08:54:42瀏覽次數(shù):546

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Native Carbonic Anhydrase II (CA2)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白的相關產(chǎn)品:內(nèi)皮脂肪mei(LIPG)重組蛋白英文名稱:Recombina Lipase, Endothelial (LIPG)內(nèi)皮脂肪mei(LIPG)重組蛋白英文名稱:Recombina Lipase, Endothelial (LIPG)內(nèi)皮脂肪mei(LIPG)重組蛋白英文名稱:Recombina Lipase, Endothelial (LIPG)

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白

Native Carbonic Anhydrase II (CA2)

Homo sapiens (Human,人)

商品介紹:

CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:天然提取

宿主Human

亞細胞定位::細胞膜, 細胞質(zhì)

預測分子量:29kDa

實際分子量:29kDa(差異分析請參閱說明書)

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:6.9

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關產(chǎn)品:

鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白Recombinant Methyltransferase Like Protein 21C (METTL21C)

鈣蛋白酶9(CAPN9)重組蛋白Recombinant Like Glycosyltransferase (LARGE)

鈣蛋白酶7(CAPN7)重組蛋白Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8)

鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 3 (PRKAg3)   

注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

ELMOD2產(chǎn)品名稱: ELMOD2蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

Phospho-FLG (Tyr766)產(chǎn)品名稱: 因子受體1(CD331)抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

UBQLNL產(chǎn)品名稱: 泛su樣蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

ART5產(chǎn)品名稱: 二磷suan苷核糖基轉(zhuǎn)移mei5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

KIAA1467產(chǎn)品名稱: KIAA1467蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep

ZP2產(chǎn)品名稱: 卵透明帶糖蛋白2抗體交叉反應: Human

UACA產(chǎn)品名稱: 葡萄膜自身抗原Uaca抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit

FKBP51產(chǎn)品名稱: 類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

VPS28產(chǎn)品名稱: 液泡蛋白分選蛋白28抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep

DEFB108B產(chǎn)品名稱: 防御suβ-108B/β-defensin 108B抗體交叉反應: Human   

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兔內(nèi)皮型一氧化氮合成mei(eNOS)ELISA試劑盒eNOS兔內(nèi)皮型一氧化氮合成meiELISA試劑盒Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit

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