產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 10:54:55瀏覽次數(shù):221
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白 | Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
CA-VA; CAVA; CAV; CA5; Carbonate dehydratase 5A, mitochondrial 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預(yù)測分子量:20.9kDa 實際分子量:20kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Arg7~Lys179 (Accession # P23589) with 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:- 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human PCK1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human HE4宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human SKAP2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human ROGDI宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
NDNF產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Cat
PRR6/CENPV產(chǎn)品名稱: 著絲粒蛋白V抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
ZNF83產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白83抗體交叉反應(yīng): Human
UCHL3產(chǎn)品名稱: 泛su硫酯meiL3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken
LSAMP產(chǎn)品名稱: 大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
NAGPA產(chǎn)品名稱: NAGPA蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
Renin產(chǎn)品名稱: 腎su/緊張su形成meiRen1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
Phospho-EEF2 (Thr56 + Thr58)產(chǎn)品名稱: 真核翻譯延長因子2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
phospho-ATF2 (Thr71)產(chǎn)品名稱: 活化復(fù)制因子2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
EMP3產(chǎn)品名稱: 上皮細胞膜蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白人神經(jīng)酰胺激mei(CERK)ELISA試劑盒CERK神經(jīng)酰胺激meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Ceramide Kinase(CERK)ELISA Kit
人神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2(NRP2)ELISA試劑盒NRP2神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2elisa檢測試劑盒Human Neuropilin 2(NRP2)ELISA Kit
人神經(jīng)纖維su1(NF1)ELISA試劑盒NF1神經(jīng)纖維su1elisa kitHuman Neurofibromin 1(NF1)ELISA Kit
人神經(jīng)細胞黏附分子(NCAM)ELISA試劑盒NCAM神經(jīng)細胞黏附分子ELISA試劑盒Human Neural Cell Adhesion Molecule(NCAM)ELISA Kit
人神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白4(NXPH4)ELISA試劑盒NXPH4神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Neurexophilin 4(NXPH4)ELISA Kit