詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
產品名稱:卵巢透明細胞癌細胞;ES-2
規格:1×10?cells/T25培養瓶
貨號:YS-02X9588
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) /FITC 熒光素標記磷酸化μ-型受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit mouse IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗小鼠IgMMulti-class antibodies規格: 0.1ml
c-erbB-4癌基因抗體 C-erbB-4/HER4/erbB-4 0.1ml
Rabbit horse IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗馬IgM 0.1ml
FGF14 英文名稱: 成纖維細胞生長因子14抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PKC-γ/SCA14 蛋白激酶C亞型G抗體 規格 0.2ml
Rabbit mouse IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗小鼠IgMMulti-class antibodies規格: 0.1ml
HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHEK1 (Ser296) 磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 規格 0.1ml
兔抗人IgG-F(ab)2 0.5ml 國產
WD SOCS box protein 2 英文名稱: 信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2抗體 0.2ml
Phospho-Dab1 (Tyr220) 英文名稱: 磷酸化Disabled 1抗體 0.1ml
phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
SPNS1 英文名稱: SPNS1抗體 0.2ml
EPS15 英文名稱: 胞吞調控蛋白Eps15抗體 0.2ml
巨噬細胞來源的趨化因子抗體 CCL22/MDC 0.1ml
VAMP-3/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HER4 (Tyr1188) 磷酸化HER4抗體 規格 0.1ml
CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白細胞粘附分子抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
卵巢透明細胞癌細胞;ES-22‘-脫氧尿苷爵床JM109
β-胸苷(dT);2'-脫氧胸苷板蘭根JM109鈣轉感受態
2’-脫氧鳥苷;2'-dG甜瓜蒂JM109電轉感受態
2‘-脫氧胞苷蜘蛛香小量酵母*轉化試劑盒
2‘-脫氧胞苷(標準品)地黃(生地黃)大量(文庫)酵母*轉化試劑盒
2’-脫氧腺苷紅杜仲酵母質粒提取試劑盒
魚精DNA升麻酵母菌斑雜交試劑盒
鮭魚精DNA白花蛇舌草/酵母β-半乳糖苷酶活性化學發光法定量檢測試劑盒