詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
產品名稱:犬巨噬細胞;DH82
規格:1×10?cells/T25培養瓶
貨號:YS-02X9582
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
P73 protein/FITC 熒光素標記P73抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit human IgG/Biotin 生物素化兔抗人IgGMulti-class antibodies規格: 0.1ml
CULLIN抗體 CULLIN/Cdc53/CUL/SCFCdc4 0.2ml
Rabbit mouse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
phospho-Filamin A (Ser1458) 英文名稱: 磷酸化細絲蛋白A抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Wee1(Ser642) 磷酸化WEE1蛋白抗體 規格 0.1ml
Rabbit human IgG/Biotin 生物素化兔抗人IgGMulti-class antibodies規格: 0.1ml
integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CD19(Ser227) 磷酸化CD19抗體 規格 0.1ml
TMB雙組分A+B液 AB液各500ml 用于ELISA
VGLL2 英文名稱: 轉錄輔助因子退變樣蛋白2抗體 0.2ml
Dnmt2 英文名稱: DNA甲基轉移酶2抗體 0.2ml
ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
SCG10 英文名稱: 神經生長相關蛋白SCG10抗體 0.1ml
EDA 英文名稱: 外胚層發育蛋白1抗體 0.2ml
X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體 XIAP 0.2ml
TSLC1/FITC 熒光素標記肺癌阻抑基因1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(Ser466) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規格 0.1ml
TrK A.B.C 神經生長因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
犬巨噬細胞;DH82α,α-二苯基-4-甲藁本(藁本)果蠅萃取物制備試劑盒
葡萄糖氧化酶藁本(遼藁本)果蠅直接法PCR擴增試劑盒
溶菌酶(蛋清)薤白(小根蒜)果蠅甲磺酸乙脂突變誘導試劑盒
HRP;辣根過氧化物酶鶴虱β-半乳糖苷酶活性原位染色試劑盒
透明質酸酶■蟾酥β-半乳糖苷酶活性化學發光法定量檢測試劑盒
抑肽酶(來源于牛肺,胰蛋白酶抑制劑)松葉β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測試劑盒
E-64,蛋白酶抑制劑人參蘆頭革蘭氏陽性基因組DNA純化試劑盒
阿齊沙坦酯廣藿香鏈霉菌屬基因組DNA純化試劑盒