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豬D二聚體(D2D)ELISA試劑盒?操作步驟
閱讀:173 發(fā)布時間:2021-9-15豬D二聚體(D2D)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
乙醇胺激酶β抗體
微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體
減數(shù)分裂內(nèi)切酶EME1抗體
延伸突觸蛋白2抗體
延伸突觸蛋白1抗體
紅細(xì)胞膜蛋白4.2抗體
轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體
內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體
環(huán)磷酸腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷酸交換因子1抗體
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體
上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體
內(nèi)皮素2抗體
內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶B3抗體
軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體
髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體
雌激素受體α抗體
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白2抗體
鋅指蛋白521抗體
大腸桿菌埃希桿菌O6抗體
植物延展素-β
內(nèi)皮素-1抗體
絲裂原活化蛋白激酶4抗體
埃茲蛋白抗體
細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體
內(nèi)皮素-1單克隆抗體
腸道病毒71型抗體
抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體
表皮生長因子抗體
表皮生長因子抗體
磷酸化真核翻譯延長因子2抗體
真核延伸因子激酶2抗體