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鼠疫桿菌(YP)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法
閱讀:768 發(fā)布時(shí)間:2021-6-21鼠疫桿菌(YP)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體
酸性鈣調(diào)蛋白3抗體
磷酸化CD156b抗體
乙醇脫氫酶5抗體
乙醇脫氫酶6抗體
溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶5抗體
遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體
免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
乙醛脫氫酶2型抗體
γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體
衰老相關(guān)蛋白5抗體
磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體
釉基質(zhì)蛋白抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白抗體
膜粘連蛋白11抗體
膜粘連蛋白13抗體
磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體