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技術文章

原代細胞污染的來源

閱讀:1296          發布時間:2017-9-30

凡混入原代細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染,細胞污染不能*被消除,但能減少其發生的頻率和后果的嚴重性。細胞污染根據污染源主要可以分為物理性,化學性和生物性污染。

物理性污染的來源、危害及預防:物理性污染常常被人們所忽視或被籠統地歸為化學性污染。物理性污染通過影響細胞培養體系中的生化成分,從而影響細胞的代謝。培養環境中的物理因素,如溫 度、放射線、振動、輻射(紫外線或熒光)會對細胞產生影響。細胞、培養液或其它培養試劑暴露于放射線、輻射或過冷過熱的溫度中,可以引起細胞代謝發生改變,如細胞同步化、細胞生長受抑制甚至細胞死亡。通過實驗室 的合理設計及建立規范的操作規程,可以減少環境中物理因素對細胞的影響。孵箱應放在溫度較恒定的環境中,周圍不能放置能引起機械振動的設備,如離心機。培養液及培養試劑應放在固定的位置,為避免光照試劑不能放在玻璃門的冰箱中,試劑周圍不能放同位素。培養液從冰箱中取出后應在室溫中放置一段時間后再進行實驗,以避免過冷的溫度對細胞的影響。

化學性污染的來源、危害及預防 :培養環境中許多化學物質都可以引起細胞的污染 。化學物質并不總是抑制細胞的生長,某些化學物質如激素就可促進細胞的生長。不同細胞對化學物質污染的反應是不一樣的。未純化的物質、試劑、水、血清、生 長輔助因子及儲存試劑的容器都可能成為化學性污染的來源。細胞培養的必需養分,如氨基酸,若濃度超過了合適的范圍,也會對細胞產生毒性。同樣,不同細胞系 其*培養條件下對血清和緩沖液的要求是不一樣的,在培養中應嚴格控制。玻璃制品清洗過程中殘留的變性劑或肥皂(通常殘留在瓶蓋的內表面)是zui常見的化學性污染。水是*一種在凝固時 膨脹的化合物。因此在選擇凍存細胞的容器時應考慮到這個因素。容器因水的膨脹而發生破裂是引起試劑污染的重要原因。為了避免金屬離子、有機分子、細胞內毒素等物質對水的污染,在配制液體,清洗容器時必須使用不含雜質的超純水 。需要注意的是,超純水放置過久其純度會下降。在高壓蒸氣滅菌及蒸餾水時水經常被污染,因為高壓蒸氣鍋及純水機的常規維護后可能有少量的化學物質殘留。為 了保證水的純度,我們應采取措施盡量避免化學物質的殘留。動物血清是原代細胞培養中常用的天然培養基,但血清又是潛在的生物及化學污染的來源。由于血清采集于多個動物,而且不同的工藝及質量各不相同,因此血 清中許多成分的濃度存在很大的變異。血清對不同細胞的促生長能力及毒副作用取決于這些細胞的分化功能、組織來源及培養基的成分等因素。在進行一系列實驗 時,為了保證實驗的可重復性,選用同一批次的血清。培養液、培養附加成分、試劑 培養液、培養附加成分、試劑都可能成為化學性污染的來源。細胞培養使用的所有物質都應是高純度的,并經過機構的鑒定,實驗者本人也應對上述成分進行 純度鑒定。同時,正確配置和儲存培養液及試劑也是非常重要的,應該采取標準的操作步驟,避免液體體積計算錯誤,混用類似化合物等錯誤。
含量測定    丙酸睪酮    對照品    100008-199404        50mg
含量測定    醋酸氟輕松    對照品    100010-200507        50mg
鑒別    醋酸氯地孕酮    對照品    100011-198501        50mg
含量測定    醋酸潑尼松    對照品    100012-200105        100mg
UV法含量測定用    地高辛    對照品    100015-200308        30mg
含量測定    地塞米松磷酸鈉    對照品    100016-20011A        100mg
含量測定    氨苯甲酸    對照品    100017-200308        50mg
檢查    對乙酰氨基酚    對照品    100018-200408        1000mg
原代細胞

 

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