詳細(xì)介紹
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES*
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由*昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES*運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
CAS6132-04-3 檸檬酸鈉,二水 100g
CAS6132-04-3 檸檬酸鈉,二水 100g
CAS6132-04-3 檸檬酸鈉,二水 100g
CAS6106-21-4 琥珀酸鈉,六水 25g
CAS6106-21-4 琥珀酸鈉,六水 25g
CAS6106-21-4 琥珀酸鈉,六水 25g
CAS6106-04-3 L- 谷氨酸鈉 25g
CAS6106-04-3 L- 谷氨酸鈉 25g
CAS6106-04-3 L- 谷氨酸鈉 25g
CAS609-99-4 3,5 二硝基水楊酸 25g
CAS609-99-4 3,5 二硝基水楊酸 25g
CAS609-99-4 3,5 二硝基水楊酸 25g
CAS6055-19-2 環(huán)磷酰胺 1g
CAS6055-19-2 環(huán)磷酰胺 1g
CAS6055-19-2 環(huán)磷酰胺 1g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g