詳細(xì)介紹
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4圖片
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來源于一男性的皮膚組織。2005年由*昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;D8S1179:11,13;D21S11:29,31;D7S820:10,11;CSF1PO:10,13;D3S1358:16;TH01: 9;D13S317:8,11;D16S539: 12;D2S1338:20,21;D19S433:13;vWA:14,18;THOX:8, 11;D18S51:15,17;D5S818:11, 12;FGA:21,24。
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
CAS6132-04-3 檸檬酸鈉,二水 100g
CAS6132-04-3 檸檬酸鈉,二水 100g
CAS6132-04-3 檸檬酸鈉,二水 100g
CAS6106-21-4 琥珀酸鈉,六水 25g
CAS6106-21-4 琥珀酸鈉,六水 25g
CAS6106-21-4 琥珀酸鈉,六水 25g
CAS6106-04-3 L- 谷氨酸鈉 25g
CAS6106-04-3 L- 谷氨酸鈉 25g
CAS6106-04-3 L- 谷氨酸鈉 25g
CAS609-99-4 3,5 二硝基水楊酸 25g
CAS609-99-4 3,5 二硝基水楊酸 25g
CAS609-99-4 3,5 二硝基水楊酸 25g
CAS6055-19-2 環(huán)磷酰胺 1g
CAS6055-19-2 環(huán)磷酰胺 1g
CAS6055-19-2 環(huán)磷酰胺 1g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS59865-13-3 環(huán)孢霉素 A 5mg
CAS59865-13-3 環(huán)孢霉素 A 5mg
CAS59865-13-3 環(huán)孢霉素 A 5mg
CAS59-67-6 煙酸 25g
CAS59-67-6 煙酸 25g
CAS59-67-6 煙酸 25g