詳細介紹
以下是相關產品:
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Recombinant Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)產品名稱:基質金屬7(MMP7)重組蛋白物種:Human,人MPSL1; MAT; PUMP-1; Matrilysin Uterine; Matrilysin; Matrin; Pump-1 Protease; Uterine Metalloproteinase
產品屬性:
產品名稱 | 物種 | 貨號 |
天冬氨酸轉氨酶(AST)活性蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D3082 |
英文名稱:Active Aspartate Aminotransferase (AST)
cCAT; AAT; ASAT; SGOT; GOT1; Cysteine transaminase, cytoplasmic; Transaminase A; Aspartate Transaminase 1,Cytoplasmic; Glutamic-Oxaloacetic Transaminase 1,Soluble
型號:GOY-01D3082
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
肝膽病學
物種:Homo sapiens (Human,人)
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:-
應用:Cellculture;ActivityAssays.
規格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養細胞蛋白提取
1. 貼壁培養的細胞,吸去培養基后,加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養液;
2. 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產品:
大鼠氣管和支氣管上細胞培養基100mL
香蒲新苷;typhaneoside 規格: 20mg 訂購|咨詢
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SW620(人結腸細胞)5×106cells/瓶×2
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TBS500ml國產
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2 ug pET-11a pET-11a 低溫運輸,-20℃保存
25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,6X) Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,6X) 常溫保存
人端粒(TE)免疫試劑盒
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綿羊5羥二十碳四烯酸(5-HETE)免疫試劑盒
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2 ug pYFPlac112 pYFPlac112 低溫運輸,-20℃保存
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25g 馬來酸鈉 Maleic Acid Disodium Salt Hydrate 室溫陰涼干燥保存