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產品名稱 | 規格 | 測試方法 | 貨號 |
輔酶ⅠNAD(H)含量微量法測試盒 | 100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6321 |
商品介紹:
測定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
測定操作表:
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
酶活性計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細胞數量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)÷T= 18×A460÷細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細胞數量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
補體成分8γ(C8γ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 8g (C8g) 96T Homo sapiens (Human)
博來霉素水解酶(BLMH)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Bleomycin Hydrolase (BLMH) 96T Homo sapiens (Human)
前梯度蛋白2(AGR2)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) 96T Homo sapiens (Human)
絡絲蛋白(RL)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Reelin (RL) 96T Rattus norvegicus (Rat)
甲狀腺激素反應基因(THRSP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Thyroid Hormone Responsive (THRSP) 96T Homo sapiens (Human)
蛋白C抑制因子(PCI)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Protein C Inhibitor (PCI) 96T Homo sapiens (Human)
妊娠相關血漿蛋白A2(PAPPA2)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Pappalysin 2 (PAPPA2) 96T Homo sapiens (Human)
補體成分1q子成分C(C1qC)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC) 96T Homo sapiens (Human)
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子11(GDF11)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子5(GDF5)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子5(GDF5)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子5(GDF5)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子3(GDF3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子3(GDF3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子3(GDF3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子1(GDF1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子1(GDF1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子1(GDF1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
干擾素誘導T-細胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
干擾素誘導T-細胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Homo sapiens (Human)
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c) 人鋅指脂蛋白-1c(抗原) 0.5mg
IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干擾素-γ多肽抗原(大、小鼠) 0.5mg
輔酶ⅠNAD(H)含量微量法測試盒IFN- Gamma(Interferon Gamma)Human 干擾素-γ多肽抗原(人) 0.5mg
IFN- Beta (Interferon Beta)Anti-mouse,rat 干擾素-β抗原 0.5mg
IFN- Beta (Interferon Beta) human 干擾素-β抗原 0.5mg
PSCA 前列腺干細胞抗原 0.5mg