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線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法

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更新時間:2022-03-14 09:53:04瀏覽次數:364

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產品簡介

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現貨 規格 25管/24樣
貨號 GOY-01S6333 應用領域 化工
主要用途 產品僅用于科研    
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法測試盒公司各類熱銷產品丙型肝炎病毒-NS1
丙型肝炎病毒-NS3
丙型肝炎病毒-NS4a
戊型肝炎病毒
庚型肝炎病毒

詳細介紹

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法測試盒
規格25/24
測試方法紫外分光光度法
貨號:GOY-01S6333
分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:
復合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體中,是線粒體內膜中最大的蛋白復合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ,同時可使O2還原生成O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產生O2.-的主要部位。測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態,而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態。

測定原理

復合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測定NADH的氧化速率計算出該酶活性的大小。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測定步驟
1
分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2
將試劑一、二、三37(哺乳動物)25(其它物種)預熱10分鐘。
3
加樣表:

圖1.jpg

樣本的前處理
FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4200g離心5min,棄沉淀,取上清在48000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
鋅指蛋白851抗體     形成素2抗體(成蛋白)

嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體     星形細胞瘤高表達蛋白抗體(環指蛋白100

0酸化c-fos抗體     星形膠質細胞抗體

0酸化原癌基因c-Jun抗體     星形膠質細胞PEA15抗體

0酸化原癌基因c-kit抗體     星形肌動蛋白抗體
大鼠膠質細胞源性神經營養因子(GDNFelisa檢測試劑盒

大鼠角蛋白1(KRT1)elisa檢測試劑盒

大鼠角蛋白18(KRT18)elisa檢測試劑盒

大鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa分析檢測試劑盒

大鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa檢測試劑盒
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法測試盒柱式植物葉綠體 DNAout15   化乙錠溶液 ,10 mg/mL1.5mL

線狀 DNA 清除劑30   化乙錠清除劑100

細菌 DNAout50   化乙錠干粉 (EB)1g

細菌 DNAout250   星形細胞生長因子5mL

柱式細菌 DNAout50   星形膠質細胞生長因子5mL
FBP活性計算:
1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應體系總體積,1×10-3 LεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.1 mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g


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