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產品名稱 | 規格 | 測試方法 | 貨號 |
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)微量法測試盒 | 100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6344 |
商品介紹:
MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。
測定原理:
MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+沒有。通過測定340 nm光吸收下降速率,來計算出MDHAR活性。
實驗中所需儀器及設備:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍和雙蒸水
測定操作表:
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
酶活性計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細胞數量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)÷T= 18×A460÷細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細胞數量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 )1mg Actin-Tracker Green( 微絲綠色熒光探針 )0.2mL
Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg Actinomycin D( 基因轉錄抑制劑 )1mg
Paclitaxel(TAXOL)( )100μL Acridine Orange(AO)100mg
PD 98059(MAPKK 抑制劑 )2mg Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL Dansyl chloride 100mg
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
Actinomycin D( 基因轉錄抑制劑 )1mg DAB 法雜交試劑盒5次
AG490(JAK 抑制劑 )5mg Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg
AICAR(AMPK 激活劑 )5mg Cycloheximide50mg
大鼠白介素15(IL15)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素15(IL-15)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素16(IL-16)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素16(IL16)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素16(IL-16)elisa檢測試劑盒
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)微量法測試盒柱式土壤 RNAout50 次 柱式微生物基因組 DNAout 50 次
真菌 RNAout50 次 柱式土壤 RNAout50 次
真菌 RNAout250 次 柱式土壤 DNAout50 次
柱式真菌 RNAout50 次 柱式探針純化試劑盒10 次
柱式真菌 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次 柱式水樣 DNAout50 次