劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
谷胱甘肽還原酶(GR)紫外分光光度法測(cè)試盒 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 | GOY-01S6373 |
商品介紹:
GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對(duì)活性氧清除起關(guān)鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)途徑。
測(cè)定原理:
GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長無吸收峰;通過測(cè)定340 nm吸光度下降速率來測(cè)定NADPH脫氫速率,從而計(jì)算GR活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1mL石英比色皿、和蒸餾水
測(cè)定操作表:
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
Indo-1,五銨鹽1mg dITP 溶液,100mM0.5mL
JC-11mg DiOC6(3) 碘化物100mg
JC-105mg DiO( 細(xì)胞膜綠色熒光探針 )10mg
Lucigenin( 光澤精 )10mg DiIC12(3) 高氯酸化物100mg
Lyso-Tracker Red( 溶酶體紅色熒光探針 )50μL DiIC1(5) 碘化物100mg
Denhardt 溶液,50×100mL 甲酰胺,PCR 級(jí)5mL
鮭魚精 DNA 溶液1mL 加 T 試劑盒50 次
鯡魚精 DNA 溶液1mL 加 A 試劑盒50 次
小牛胸腺 DNA 溶液1mL 即用型長片段 PCR 試劑盒20 次
熒光尺1個(gè) 即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次
大鼠γ氨基丁酸(GABA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠γ氨基丁酸(GABA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠γ-氨基丁酸(GABA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠γ-氨基丁酸(γABA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠γ-氨基丁酸受體亞基α1(GABRA1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
谷胱甘肽還原酶(GR)紫外分光光度法測(cè)試盒真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.066200mL
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次 大鼠淋巴細(xì)胞分離液 1.083200mL
草桿菌 PCR Mix 4100 次 大鼠粒細(xì)胞分離液 1.119200mL
高 GC 革氏陽性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次 大鼠單核細(xì)胞分離液 1.082200mL
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次 大鼠白細(xì)胞分離液 1.084200mL
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