詳細(xì)介紹
商品介紹:
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
測定原理
淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值,一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的的儀器和用品
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
產(chǎn)品名稱:淀粉分支酶(SBE)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6683
分類:淀粉系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
脂肪甘油三酯脂酶抗體 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體
雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)抗體 轉(zhuǎn)錄延伸因子NELF抗體
能量平衡相關(guān)蛋白抗體 轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體
禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體
唾液酸糖蛋白受體1抗體 轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4抗體
大鼠補體片斷5(C5)elisa檢測試劑盒
大鼠補體片斷5a(C5a)elisa分析檢測試劑盒
大鼠補體片斷5a(C5a)elisa檢測試劑盒
大鼠補體受體2(CR2)elisa檢測試劑盒
大鼠補體因子B(CFB)elisa檢測試劑盒
淀粉分支酶(SBE)可見分光光度法測試盒磁珠植物 DNAout50 次 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.050 次
大提柱式植物 DNAout4次 一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0100 次
百萬堿基級植物 DNAout 10 次 一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
Southern 級植物 DNAout 10 次 一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout50 次
一管式植物 DNAout50 次 一步法大提質(zhì)粒 DNAout5次