詳細介紹
商品介紹:
細胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的酶系,在外源物質代謝中,尤其是藥物和毒物的代謝,具有重要作用。ERND在P450酶系中相當于CYP2B亞型,與藥物代謝的去甲基化密切相關。CYP2B具有催化底物形成非活性易于排泄的代謝產物而具有解毒作用,也可使某些藥物經CYP2B代謝活化。
測定原理:
ERND催化紅霉素釋放甲醛,通過Nash比色測定甲醛含量,即可計算出ERND活性。
自備儀器和用品:
普通離心機,超速離心機、可調式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和冰。
產品名稱:紅霉素N脫甲基酶(ERND)微量法測試盒
規格 : 100管/48樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6782
分類:P457系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
炭疽桿菌致死因子LF抗體 原癌基因H-ras抗體
0酸化相關死亡促進因子抗體 原癌基因FRAT1抗體
肌動蛋白樣蛋白6A抗體 原癌基因c-Met相關激酶抗體
0酸化紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 原癌基因cMAF抗體
障礙自整合蛋白BAF抗體 原癌基因CD39樣蛋白4抗體
大鼠谷氨酰胺(Gln)elisa分析檢測試劑盒
大鼠谷氨酰胺(Gln)elisa檢測試劑盒
大鼠谷氨酰胺合成酶(GLUL)elisa分析檢測試劑盒
大鼠谷氨酰胺合成酶(GLUL)elisa檢測試劑盒
大鼠谷氨酰胺合成酶(GS)elisa檢測試劑盒
紅霉素N脫甲基酶(ERND)微量法測試盒氨芐溶液 ,50mg/mL10mL TMB 法雜交試劑盒5次
氨芐干粉1g TLR4 激活劑2mL
溶液 ,100mg/mL1mL TG1 化學感受態細胞0.1mL×10
溶液 ,10mg/mL1mL TdT 加尾法 DNA 標記試劑盒5次
溶液 ,50mg/mL1mL TdT 加尾法 DNA 標記試劑盒5次