詳細介紹
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:土壤中性磷酸酶(SNP)可見分光光度法測試盒
規格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6833
分類:土壤系列
商品介紹:
土壤磷酸酶是催化土壤有機磷礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響,根據最適PH范圍,一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。
測定原理:
中性環境中,S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計算出NP活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端) 樁蛋白Paxillin抗體
載脂蛋白C3抗體 轉運蛋白家族39成員7抗體
腺苷酸環化酶2抗體 轉運蛋白G3PP抗體
載脂蛋白E4抗體 轉運蛋白DISP2抗體
自噬相關基因AMBRA1抗體 轉運蛋白1抗體
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土壤中性磷酸酶(SNP)可見分光光度法測試盒RNA 級 CTAB ( 十六烷基基化銨 )100g 脂蛋白純化試劑盒50 次
RNA 級 DEPC ( 焦碳酸 )10mL 脂蛋白 PAGE 染液1套
RNA 級 DTT ( 二硫代蘇糖醇 )10g 支氣管上皮細胞生長因子5mL
RNA 級 EDTA·2Na ( 四乙酸二 )100g 支氣道上皮細胞生長因子5mL
RNA 級 Guanidium HCl ( 鹽酸胍 )100g 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。