詳細介紹
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:土壤亮氨酸氨基肽酶(SLAP)微量法測試盒
規格 : 100管/48樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6855
分類:土壤系列
商品介紹:
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態密切相關。
測定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
自備用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
液相內毒素清除劑500 次 通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次
固相內毒素清除劑100g 通用型 LAMP 試劑盒50 次
固相內毒素清除劑500g 通用 miRNA 克隆接頭0.83nmol
柱式內毒素清除劑1.5mL 填入法 DNA 末端標記試劑盒 C5次
內毒素清除專用親和介質5mL 填入法 DNA 末端標記試劑盒 B5次
填入法 DNA 末端標記試劑盒 C5次 接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
DNA 5’末端標記試劑盒10 次 接頭 DNA(pSma I)5nmol
dNTP 溶液 ( 標記專用 )0.5mL 接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
標記 dUTP 溶液50μL 接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL 接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)活性測定試劑盒
γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)活性測試盒
γ-谷氨酰轉移酶γ-GT測試盒 96T 100管/50樣 微板法
吖啶橙染色試劑盒100T
吖啶橙染色液100T
土壤亮氨酸氨基肽酶(SLAP)微量法測試盒miRNA 電泳分子量標準30 次 鳥類種屬鑒定 PCR Mix100 次
微量 RNA 助沉劑0.1mL 尼龍膜,13×20cm1張
微量 DNA 助沉劑0.1mL 內皮細胞生長因子5mL
DNA 級 Acryl 助沉劑1mL 內毒素清除專用親和介質5mL
彩色 Acryl 助沉劑1g 內毒素清除專用親和介質50mL
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。