詳細介紹
產品名稱:脫氫酶(DHA)可見分光光度法測試盒
規格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6937
分類:其它系列
商品介紹:
脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。
測定原理
在細胞呼吸過程中,氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現紅色,于485nm測定其吸光值,即得脫氫酶活性。
自備實驗儀器及用品
天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
凋亡加強結構域蛋白8抗體 絲氨酸羧肽酶1抗體
凋亡加強結構域蛋白7抗體 絲氨酸羧甲半合成酶抗體
β衣被蛋白抗體 絲氨酸蘇氨酸激酶1受體相互作用蛋白抗體
半胱胺酸蛋白酶4/11抗體 絲氨酸或半蛋白水解酶抑制蛋白1抗體
半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗體 絲氨酸合并蛋白3抗體(腫瘤差異表達蛋白)
大鼠線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)elisa檢測試劑盒
大鼠腺病毒(ADV)抗體(IgG)elisa檢測試劑盒
大鼠腺病毒抗體(FL/K87-Ab)elisa檢測試劑盒
大鼠腺苷A1受體(ADORA1)elisa檢測試劑盒
大鼠腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)elisa檢測試劑盒
脫氫酶(DHA)可見分光光度法測試盒DMSO,PCR 級1.5mL 固相 RNase 清除劑100mL
海藻糖溶液,1.5M,PCR 級1.5mL 鈷柱介質10mL
甜菜堿溶液,5M,PCR 級1.5mL 骨骼肌細胞生長因子5mL
綠如藍染料,PCR 級0.1mL 甘肽瓊脂糖2mL
綠如藍染料,PCR 級1mL 甘肽 S 轉移酶1mg
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!