詳細介紹
商品介紹:
GCS(EC 2.4.1.11)催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷鍵相連延長糖鏈,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰島素作用的主要靶酶,對糖代謝的調節和血糖穩態的維持具有重要作用。
測定原理:
GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映GCS活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產品名稱 | 規格 | 測試方法 | 貨號 |
糖原合成酶(GCS)紫外分光光度法測試盒 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 | GOY-01S6974 |
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
測定操作表:
酶活性計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細胞數量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)÷T= 18×A460÷細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細胞數量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
凝膠法 miRNA 分離試劑盒 50 次 柱式腐殖酸清除劑30 次
一站式大提柱式 miRNAout5次 柱式腐殖酸清除劑100 次
一站式動物 mRNAout25 次 柱式糞便 RNAout50 次
一站式全血 mRNAout25 次 柱式糞便 DNAout50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取試劑盒50 次 柱式分枝桿菌 RNAout50 次
柱式尿液 DNAout50 次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次
柱式鼠尾 DNAout50 次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒100 次
柱式海洋動物 DNAout50 次 一步式 RT-PCR Mix 1mL
植物 DNAout50 次 一步式 PAGE 染液10 次
柱式植物 DNAout50 次 一步離心式石蠟清除劑100 次
Bradford 蛋白定量試劑盒1000T
Bradford 蛋白定量試劑盒250T
Bradford法蛋白檢測試劑盒 100T/96樣
BSA標準1ml
BSA標準5ml
糖原合成酶(GCS)紫外分光光度法測試盒AP 標記的抗抗體10μL 環氧基磁珠2mL
HRP 標記的抗抗體10μL A 溶液 ,10mg/mL1mL
顯影定影套裝1套 滑膜細胞生長因子5mL
顯影粉1袋 紅細胞裂解液 B 型 ( 流式細胞分析用 ) 100mL
定影粉1袋 紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL
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