詳細(xì)介紹
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
AhR Elisa Kit | 96T/48T | GOY-1296E |
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)
算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CM-R094大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 肝細(xì)胞,BRL細(xì)胞 TE 115.T(人軟組織纖維瘤細(xì)胞)
小鼠淋巴細(xì)胞白血病;L1210
EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CM-R094大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 肝細(xì)胞,BRL細(xì)胞 TE 115.T(人軟組織纖維瘤細(xì)胞)
小鼠淋巴細(xì)胞白血病;L1210
EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
EGFL7 Others Mouse 小鼠 EGFL7 / VE-statin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小膠質(zhì)細(xì)胞生長添加物MGS
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920
SAC-IIC3細(xì)胞,腹水瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,CACO-2細(xì)胞 斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9
大鼠肝細(xì)胞;IAR20
ACVR1 Others Mouse 小鼠 ALK-2 / ACVR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
AhR人芳香烴受體elisa試劑盒品牌JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。公司產(chǎn)品僅用于科研