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769-P (腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)

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更新時間:2022-04-01 16:12:59瀏覽次數(shù):421

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0009 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研    
769-P (腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品非酶 DNA 清除劑 -215 次 柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
柱式 DNA 清除劑50 次 柱式 BAC DNAout 50 次
大提柱式 DNA 清除劑5次 周細(xì)胞生長因子5mL
無 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL300U 重組蛋白 L1mg
膜結(jié)合 DNA 清除試劑盒50 次 重組蛋白 G1mg
柱式病

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

769-P (腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0009

名稱    769-P (腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 769P; 769-p

種屬 人類

年齡(性別) 女性,63

組織來源 器官:腎;疾病:腎透明細(xì)胞腺癌

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 769-P細(xì)胞來源于原發(fā)性透明細(xì)胞腺癌;769-P細(xì)胞呈邊界不清楚的球形、高核質(zhì)比、有微絨毛和橋粒;769-P細(xì)胞可以在軟瓊脂中生長。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時間 ~35小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37

致瘤性 Yes, forms colonies in soft agar. Yes, forms tumors in immunosuppressed hamsters. Yes, forms tumors in nude mice.

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1933

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實(shí)驗(yàn)報告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2
PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5
PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
0酸化蛋白富集試劑盒10   RNase-free 乙酸 ,3M,pH 5.2100mL

ConA 糖蛋白分離試劑盒10   RNase-free 鹽酸胍溶液 ,8M100mL

WGA 糖蛋白分離試劑盒10   RNase-free 1mL

包涵體微量純化試劑盒20   RNase-free 10mL

包涵體中量純化試劑盒5  RNase-free 氯化溶液 ,10M100mL
大鼠天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)elisa檢測試劑盒

大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)elisa檢測試劑盒

大鼠糖原磷酸化酶(GP)elisa檢測試劑盒

大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
769-P (
腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)caspase-6活性檢測試劑盒分光光度法 20T50T100T

caspase-8活性檢測試劑盒分光光度法 20T50T100T

caspase-9活性檢測試劑盒分光光度法 20T50T100T

Caspase抑制劑Z-VAD-FMK (20mM)

CCK-8細(xì)胞活力檢測試劑盒微板比色法 100T

 


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