詳細介紹
產品詳細介紹:
本產品是利用Taq DNA多聚酶不具有3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的dNTP濃度、Mg濃度和MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。 產品特點: 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。 配方經過精心優化,實驗人員在一定范圍內可以控制突變率,一輪PCR的突變率范圍在2-8突變/1000bp,更高的突變率可以通過多輪PCR達到。 可用于連續易錯PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯PCR的產物用作下一次易錯PCR的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。 可以擴增的DNA片段更長,達到2kb,對于2kb以上的產物,建議分段擴增。 保存:-20℃,有效期一年。 |
下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
Controlled Error-prone PCR Kit | 100次 | GOY-F10253 |
DNA提取流程圖:
圖
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
人脂肪型脂肪酸結合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒 2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol 114916-00-6 中文名: 分子式:C13H11ClOS2 度:98.5% 關鍵詞: 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白elisa試劑盒 人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒、人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 中文名: 分子式:C16H15ClN4O 度:98.0%
人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒 2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol 114916-00-6 中文名: 分子式:C13H11ClOS2
人脂肪酸結合蛋白elisa試劑盒 人脂肪酸結合蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 人脂肪酸結合蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人脂肪酸結合蛋白試劑盒、人脂肪酸結合蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 中文名: 分子式:C16H15ClN4O
人脂肪酸結合蛋白(FABP)ELISA試劑盒 2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone 中文名: 分子式:C11H7NO4 度:%
熒光素 Fluorescein 質量規格:AR RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鈣黃綠素 Calcein 質量規格:IND IL蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
瑞氏色素 Wright's stain 質量規格:BS NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISA試劑盒裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
吉氏色素,姬姆氏色素 Giemsa stain 質量規格:BS 小鼠甲狀(T4)ELISA 試劑盒
6-FAM, SE;6-羧基熒光素琥珀酯 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester 質量規格:0.9 Rat soluble Toll like receptor 6 (sTLR6) ELISA Kit 大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒
6-FAM ;6-羧基熒光素 6-Carboxyfluorescein 質量規格:0.95 HumanMannmabindinglectieceptor,MBLRELISAKit 人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
5-FAM ;5-羧基熒光素 5-Carboxyfluorescein 質量規格:>95% Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISA試劑盒人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
黑色素(水溶) Nigrosine water soluble 質量規格:BS 植物精(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20
黑色素(溶) Nigrosin alcohol soluble 質量規格:BS HumanVitaminD3,VD3ELISAKit人D3(VD3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
7-羥基;傘形花內酯(標準品) 7-Hydroxycoumarin 質量規格:GC≥98%,標準品 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 ,英文名: TG ELISA Kit
可調式易錯PCR試劑盒藻類細胞鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
真菌/酵母細胞鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
植物鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
藻類細胞亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒
真菌/酵母細胞亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。