詳細介紹
產品詳細介紹:
本系列探針是主要對活細胞中的酸性區室(如溶酶體、頂體)動態合成和功能進行研究的一類熒光探針,該類探針的染色具有向酸性,可通過質子化作用在酸性細胞器內累積。該類探針的這種質子化作用還可解除染料的熒光淬滅性,使其所發射的熒光強度更強。因此,本系列探針隨著細胞器的酸化程度其熒光強度呈pH依賴型(向酸)增強。本品Green DND-189具有較低的pKa值,僅在酸性區室內才具有熒光。本品以溶于無水DMSO的1mM儲存液形式提供。如對活細胞中的酸性區室進行選擇性標記和染色,可選擇SY0569、SY0570探針。 分子式:C24H22N4O2 分子量:398.46 Ex/Em:443/505 pKa:~5.2 顏色:綠色 儲存條件:-20℃干燥,有效期6個月 |
下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
Lysosome Green DND-189 | 50μl | GOY-F10235 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯吸附測定試劑盒 Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 183075-03-8 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0% 關鍵詞: 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0%
人組胺elisa試劑盒 人組胺試劑盒 規格型號:96T/48T 人組胺試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人組胺試劑盒、人組胺elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 1220891-22-4 中文名: 分子式:C10H10O3 度:97.0% 關鍵詞: 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
人組胺(HIS)ELISA試劑盒 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5
人組胺(HIS)ELISAKit 3,4-Didehydrosapriparaquione 142763-37-9 中文名: 分子式:C20H24O3 度:95.0% 關鍵詞:
N-芐氧羰基-L- Z-Gln-OH 質量規格:>98%,BR ELISAKitAChRab人乙酰受體抗體規格:48T/96T
N-CBZ-L-丙 CBZ-L-Gly 質量規格:>98%,BR 小鼠角化細胞生長因子(KGF/FGF-7)ELISA試劑盒 ,英文名: KGF/FGF-7 ELISA Kit
鹽酸丙美卡因 Proparacaine HCl 質量規格:>98%,BR 大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測試劑盒Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T
N-芐氧羰基-L-絲 Z-Ser-OH 質量規格:>98.5%,BR 人促甲狀受體(TSHR)抗體試劑盒 Human TSHR aibody ELISA Kit
N-芐氧羰基-L-蘇 Z-Thr-OH 質量規格:0.98 RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯分析大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯分析體(sEPCR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
N-CBZ-beta-丙 Z-β-Ala-OH 質量規格:0.98 HSV(HERPESSIMPLX)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
CBZ-D-谷α-芐酯 Z-Glu-OBzl 質量規格:>98% Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
N-芐氧羰基-L-酪 Z-Tyr-OH 質量規格:0.98 小鼠角化細胞因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒 ,英文名: AR ELISA Kit
Z-L-酪甲酯 Z-Tyr-OMe 質量規格:>98%,BR 大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA檢測試劑盒RatCyclin-D1ELISAKit 96T/48T
鈉 Amoxicillin 質量規格:>90%,BR 人促甲狀受體(TSHR)試劑盒 Human TSHR ELISA Kit
溶酶體綠色熒光探針細胞組織D(CATHEPSIN D)活性比色法定量檢測試劑盒
體液樣品組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒
血液樣品組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒
組織樣品組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。