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詳細介紹
DNA提取流程圖：
下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
100T | GOY-F10225 |
產品詳細介紹：
保存：置4℃。 工作量：100 張切片。 有效期：一年。 所謂原位雜交是指借助于核酸分子雜交的方法，在顯微鏡水平檢測和定位特異的核苷酸片段。現在原位雜交已成為在分子水平研究腫瘤和遺傳性疾病的發生，發展和調控等根本性問題的有力工具，其作用是免疫組化所無法代替的。具有敏感性特高，操作簡便和結果準確的優點。該試劑盒用于 mRNA的雜交，不推薦使用每個探針分子僅標記一個的寡核苷酸探針。 如果使用 cDNA 探針，應在雜交之前變性探針。 試劑盒中內容： 1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml； 2．預雜交液 2ml； 3.寡核苷酸探針雜交液 2ml； 4.封閉液 5ml; 5.化鼠抗 5ml; 6．SABC-FITC 100ul(1:100) |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
三0酸腺苷酶 英文名稱： Adenosine iphosphate 規格： 48T/96T 英文縮寫： ATP 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 16691-43-3 中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式：C2H4N4S 度：98.0%
三0酸脫氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml Amoxapine 中文名：阿莫沙平 分子式：C17H16ClN3O 度：98.0%
三(羥甲基)基鹽酸鹽 100g 3-Amino-4-methylbenzamide 19406-86-1 中文名：3-氨基-4-甲酰胺 分子式：C8H10N2O 度：98.0%
腮腺炎病毒(MuV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 1571-72-8 中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式：C7H7NO3 度：98.0%
瑞氏－姬姆薩復合染液 Vascular permeability test solion 3-Amino-3-phenylpropionic acid 614-19-7 中文名：C9H11NO2 分子式：C9H11NO2 度：98.0%
N-乙酰-DL-甲硫 N-Acetyl-DL-mine 質量規格：0.99 人α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA檢測試劑盒Humanα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit 96T/48T
DL-高半胱 DL-Homocysteine 質量規格：0.95 大鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA kit
間氟-DL-酪 m-Fluoro-DL-tyrosine 質量規格：0.99 英文名稱RatFree-TestoteroneELISAKit大鼠游離睪同(Free-Testoterone)規格：96T/48T
鈣蛋白酶抑制劑I(進口) Calpain Inhibitor I(ALLN) 質量規格：≥95%,美國進口 革蘭氏陽性細菌基因組DNA化試劑盒20
DL-丙氨酰-DL-丙 DL-Ala-DL-Ala 質量規格：0.97 ELISAKitHBxAg人乙型肝炎病毒X抗原規格：48T/96T
DL-丙氨酰-DL-正纈 DL-Alanyl-DL-norvaline 質量規格：0.99 小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MT-1 ELISA Kit
3-(1-萘基)-L-丙 3-(1-Naphthyl)-L-alanine 質量規格：>98%,BR 大鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 96T/48T
Fmoc-3-(2-萘基）-D-丙 Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine 質量規格：0.98 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 Human secretin receptor,SR ELISA Kit
L-瓜 L-Citrulline 質量規格：>99%,BR RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Fmoc-L-瓜 Fmoc-L-Citrulline 質量規格：>98%,BR HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
敏感性加強型原位雜交檢測試劑盒Ⅴ(FITC)組織冠狀病毒3C類（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性
熒光淬滅法定量檢測試劑盒
細胞冠狀病毒3C類（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性
體液人類巨細胞病毒（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法
血液人類巨細胞病毒（HCMV PROTEASE）活性熒光淬滅法
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
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