詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
Fluo 3-AM | 100μg|1mg | GOY-F10224 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
Fluo-3,AM ester是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3,AM ester進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)源性酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,大激發(fā)波長為506nm,大發(fā)射波長為526 nm。Fluo-3,AM ester的一個重要作用是其在高通量藥物篩選中的應(yīng)用。 CAS:121714-22-5 分子式:C51H50Cl2N2O23 分子量:1129.85 純度:≥90%(HPLC) 外觀:紅色粉末 儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期12個月 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
山梨含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 3-Aminopiperidine di 334618-23-4 中文名: 分子式:C5H14Cl2N2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
色素上皮細(xì)胞衍生因子 (PEDF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Peri acid 82-75-7 中文名:周位酸 分子式:C10H9NO3S 度:98.0%
傘形 10g 4-Aminobenzophenone 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 度:99.0%
三乙酸 100g 3-Aminoadamantan-1-ol 702-82-9 中文名: 分子式:C10H17NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
三0酸腺苷酶 英文名稱: Rat Adenosine iphosphate 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ATP 3-Amino-5-phenylpyrazole 1572-10-7 中文名:3-氨基-5-吡唑 分子式:C9H9N3 度:98.0%
DL-組 DL-Histidine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 英文名稱RatFree-T4ELISAKit大鼠游離甲狀(Free-T4)規(guī)格:96T/48T
DL-組鹽酸鹽 DL-Histidine·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水物,BR 革蘭氏陽性細(xì)菌基因組DNA化試劑盒20
DL-高苯丙 DL-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitHBxAg人乙型肝炎病毒X抗原規(guī)格:48T/96T
DL-高絲 DL-Homoserine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒 ,英文名: MT-2 ELISA Kit
克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸 Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,MET抑制劑 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA檢測試劑盒RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 96T/48T
DL-賴鹽酸鹽 DL-Lysine·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人促胰液素/胰泌素(Secretin)試劑盒 Human Secretin ELISA Kit
DL-正纈 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-正纈 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:0.99 HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2
DL-焦谷 DL-Pyroglutamic acid 質(zhì)量規(guī)格:0.98 MouseVitaminC,VCELISA試劑盒小鼠C(VC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-叔亮 DL-tert-Leucine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒 ,英文名: MT1 ELISA Kit
鈣離子熒光探針Fluo 3-AM細(xì)胞(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒
組織切割酶/β分泌酶(MENAPSIN 2;β-SECRETASE)活性
細(xì)胞切割酶/β分泌酶(MENAPSIN 2;β-SECRETASE)活性
組織艾滋病毒1(HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法
細(xì)胞艾滋病毒1(HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法