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中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
1mg | GOY-F10217 |
產品詳細介紹:
二氫羅丹明123(346.38MW)是一種不帶電荷,非熒光的活性氧(ROS)檢測指標,可以被動跨膜擴散,它在線粒體中被氧化成若丹明123 陽離子,呈現綠色熒光(Ex/Em=507/529 nm)。 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
上 英文名稱: Adrenalin/ 英文縮寫: ADR 規格: 48T/96T 3-Hydroxycatalponol 265644-24-4 中文名: 分子式:C15H18O3 度:97.0% 關鍵詞: 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
上皮鈣粘蛋白 英文名稱: Human E.cadherin 規格: 48T/96T 2''-O-Acetylsprengerinin C 中文名: 分子式:C46H72O17 度:%
山羊胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 162401-62-9 中文名: 分子式:C12H12F2O4
山羊胰島素 英文名稱: lnsulin 規格: 48T/96T 英文縮寫: INS 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one 中文名:3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮 分子式:C21H30O2
山羊血小板衍化生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 組裝/原裝 3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3 度:98.0%
頭孢硫脒;先鋒18號 Cefathiamidine 質量規格:>97%,BR ELISAKitAP人抑肽酶規格:48T/96T
D-絲 H-D-Ser-OH 質量規格:>98%,BR 小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 ,英文名: MDC/CCL22 ELISA Kit
D-絲甲酯鹽酸鹽 D-Serine methyl ester 質量規格:>98%,BR 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin4,AQP-4ELISAKit 96T/48T
D-蘇 H-D-Thr-OH 質量規格:>98%,BR 人催產素受體(OX)試劑盒 Human OX ELISA Kit
D-色甲酯鹽酸鹽 D-Tryptophan methyl ester 質量規格:0.98 Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
N-乙酰-D-色 N-Acetyl-D-tryptophan 質量規格:0.98 HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE細胞膜變檢測試劑盒50
D-酪甲酯鹽酸鹽 H-D-Tyr-OMe·HCl 質量規格:0.99 MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA試劑盒小鼠內臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷 2'-O-Methyladenosine 質量規格:>98%,BR 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒 ,英文名: MCSF ELISA Kit
D-纈 D-Valine 質量規格:>98%,BR 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T
2'-脫氧鳥苷-3'-單二鈉 2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt 質量規格:>98%,BR 大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒 Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
活性氧ROS熒光探針 DHR123組織基質金屬(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞基質金屬(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒
體液基質金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
組織基質金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
細胞基質金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒