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細(xì)胞pH指示熒光探針

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  • 型號 50μL
  • 品牌 R&D/美國
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2022-04-22 11:01:33瀏覽次數(shù):304

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10168
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
細(xì)胞pH指示熒光探針公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)胞二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒
組織二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒
血液二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒
體液二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒
細(xì)胞多胺氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

CECF 具有45 個負(fù)電荷,pH78,有助于在胞內(nèi)滯留。其AM 形式的乙酰酯衍生物具有膜透性,可以被動穿過細(xì)胞膜。且BCECF,AM 本身不發(fā)出熒光,通過胞內(nèi)酯酶作用后成為BCECF 發(fā)出熒光信號,可以作為細(xì)胞活力的判斷依據(jù)之一。

修飾AM 乙酸酯集團(tuán)上的羧酸,使之不帶電荷,可以滲透進(jìn)入細(xì)胞膜,一旦進(jìn)入細(xì)胞,其親脂保護(hù)基團(tuán)可以被酯酶非特異性的脫去,成為帶電荷形式,相較于原來的AM 形式,帶電荷形式在胞內(nèi)可以更久的滯留。

BCECF 也用于灌注組織,細(xì)胞間隙,植物細(xì)胞,對細(xì)菌和酵母進(jìn)行pH 測量。BCECF,AM 可以用于檢測細(xì)胞生存能力,細(xì)胞毒性,凋亡、粘附和多藥耐藥性以及趨化性等多種功能性檢測。

本試劑為儲液濃度,保存于-20℃,如需進(jìn)行連續(xù)性實(shí)驗(yàn),請盡快用完。如果儲液在大于400nm 下有很強(qiáng)的吸光度說明溶液中含有較多的水分,就必須被稀釋立刻使用,而不能被儲存。BCECF,AM 通常應(yīng)該是無色無熒光信號。

濃度:5mM in 無水DMSO

儲存:-20℃,避光,有效期6個月

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

細(xì)胞pH指示熒光探針

BCECF, AM

50μL

GOY-F10168

 

DNA提取流程圖:
QQ截圖20220414142532.png
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)
實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit     5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名:  分子式:C8H8OS2  度:98.0%

兔結(jié)締組織生長因子(rabbit CTGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  239463-72-0  中文名:  分子式:C22H25N3O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒     5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名:  分子式:C13H15N3O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit     4-Chloro-6-iodoquinazoline  98556-31-1  中文名:  分子式:C8H4ClIN2 

兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit     4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  中文名:  分子式:C14H10BrN  度:98.0%
2,4,6-
(五氟乙基)-1,3,5-三嗪(>95.0%(GC))  2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA檢測試劑盒Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T

2,4,6-(七氟丙基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人蛋白酶3(PR3)試劑盒 Human PR3 ELISA Kit

α-巰基甘油(>98.0%(GC)(T))  α-Thioglycerol   質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) Ratp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit大鼠P53(P53)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸(>99.0%(GC)(T))  3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid   質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T) GMEM培養(yǎng)基1/10(片劑)

4'-羥基偶氮苯-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T))  4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic Acid  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA試劑盒小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

4'-羥基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T))  4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid Hydrate  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒 ,英文名: sTLR2 ELISA Kit

羧基甲氧基胺半鹽酸鹽(>98.0%(T))  Carboxymethoxylamine Hemi  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 大鼠A(VA)ELISA檢測試劑盒RatVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

吉拉德試劑 P(>95.0%(T))  Girard's Reagent P  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 人蛋酸酶2(2A),催化亞基,β亞型(PPP2CB)試劑盒 Human PPP2CB ELISA kit

4--1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %)  4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione  質(zhì)量規(guī)格:含氮量:23.50-24.30 % RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

N-叔丁基-α-硝酮(>98.0%(HPLC)(T))  N-tert-Butyl-α-phenylnitrone  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) GMS10電擊感受態(tài)細(xì)菌轉(zhuǎn)化試劑盒10
細(xì)胞pH指示熒光探針組織GSK3激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細(xì)胞GSK3激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織GSK3β激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細(xì)胞GSK3β激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織GSK3α激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C
操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
c
.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。


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