詳細介紹
DNA提取流程圖:
下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
Super hybrid solution(Oligo probe) | 10mL | GOY-F10155 |
產品詳細介紹:
本產品為即用型Oligo探針專用核酸雜交液。核酸雜交一般是指用一種標記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交,由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子(靶分子)。核酸雜交是分子生物學的基本技術之一,應用非常廣泛。 產品特點: 1. 既可以用于DNA Oligo探針,也可以用于RNA Oligo探針。 2. 即開即用,使用方便。 儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔色素上皮衍生因子elisa試劑盒 兔色素上皮衍生因子試劑盒 規格型號:96T/48T 兔色素上皮衍生因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 5-Benzimidazolecarboxylic acid 15788-16-6 中文名:5-苯并咪唑甲酸 分子式:C8H6N2O2 度:98.0% 關鍵詞:
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 5-Benzoylpentanoic acid 中文名:5-苯甲酰基戊酸 分子式:C12H14O3 度:98.0%
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit 5-Azacytidine 320-67-2 中文名:5-氮胞苷 分子式:C8H12N4O5 度:98.0% 關鍵詞:
兔軟骨糖蛋白39(rabbit YKL-40) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C7H4ClNO4
兔軟骨寡聚基質蛋白(rabbit COMP) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 4-Hydroxythiobenzamide 中文名: 分子式: 度:98.0%
三環唑標準溶液(10μg/ml,u=2%) Tricyclazol solution 質量規格:10μg/ml,u=2% RatomeinELISAKit大鼠網膜素(omein)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氟樂靈標準溶液(100μg/ml,u=3%) Trifluralin solution 質量規格:100μg/ml,u=3% FITC蛋白標記試劑盒3(200微克/)
草達津(標準品) Trietazine 質量規格:分析標準品 Mousesexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
阿克泰(分析標準品,98%) Thiamethoxam 質量規格:分析標準品,98% 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)ELISA 試劑盒
三唑酮(分析標準品,99.8%) Triadimefon 質量規格:分析標準品,99.8% Rat macrophage colony stimulating factor (M-CSF) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
無水硫酸鈉(分析標準品,pestizides≤1 ppm) sulfate anhydrous 質量規格:分析標準品,pestizides≤1 ppm HumanMethemoglobin,MHBELISAKit 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
甲嘧磺隆(標準品) Sulfometuron-methyl 質量規格:分析標準品 Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
西草凈(分析標準品,97%) Simetryne 質量規格:分析標準品,97% 植物NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20(10樣本)
喹禾靈(分析標準品,96%) Quizalofop-ethyl 質量規格:分析標準品,96% MouseactivatedproteinC,APCELISAKit小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規格:96T/48T
精喹禾靈(分析標準品,98%) Quizalofop-p-ethyl 質量規格:分析標準品,98% 小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 ,英文名: sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit
超級雜交液(Oligo探針)細胞PKCε激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織PKCδ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞PKCδ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)