下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
小牛胸腺DNA溶液 | Calf Thymus DNA Solution | 1mL | GOY-F10147 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本產(chǎn)品是濃度為10mg/mL的、經(jīng)過(guò)熱變性處理的單鏈小牛胸腺DNA溶液,可以用于Southern、Northern預(yù)雜交,還可以用于酵母化學(xué)轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化。本產(chǎn)品即開(kāi)即用,非常方便。 儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸和-20℃保存、有效期一年。 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見(jiàn)后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISAkit 4-Aminobutyric acid 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2 度:98.0%
兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Benzyloxyindole 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0%
兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 度:98.0%
兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISAKit 6-Hydroxyrubiadin 中文名:6-羥基甲基異茜草素 分子式:C15H10O5
兔內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(rabbit VEGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 147619-40-7 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2
油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC)) Methyl oleate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC) 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMNElastase)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit 96T/48T
異丁香酚(正+反)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析) Isoeugenol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析 大鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 Rat Thrombopoietin,TPO ELISA kit
正壬烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)) Nonane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC) 英文名稱(chēng)RattotalhemolyticcomplemeELISAKit大鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格:96T/48T
1-萘酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Naphthol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
N-二乙基亞硝胺(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Nitrosodiethylamine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitMUC5B人粘蛋白/粘液素5B規(guī)格:48T/96T
壬酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)) Nonoic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC) 小鼠酪酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒 ,英文名: TH ELISA Kit
萘-D8(標(biāo)準(zhǔn)品) Naphthalene-d8 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAngiogenin,ANGELISAKit 96T/48T
二十五烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)) Pentacosane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC) 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)試劑盒 Human LRP-4 ELISA Kit
9,10-二甲基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品) 9,10-Dimethylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9,10-二蒽(標(biāo)準(zhǔn)品) 9,10-Diphenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 FGP處理DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20
小牛胸腺DNA溶液細(xì)胞RSK3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織RSK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞RSK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織RSK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞RSK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)