DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒     5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二  分子式：C19H32O2  度：98.0%

兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit                 Adipic dihydrazide  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2 

兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒   兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒、兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  6-Aminoindole  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%

兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒              5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二  分子式：C19H32O2 

兔抑瘤素M(OSM)ELISAKit     5α-Androstane-3β,17β-diol  571-20-0  中文名：5α-雄烷二  分子式：C19H32O2  度：98.0%
化鉀(光譜SP)  Potassium bromide  質(zhì)量規(guī)格：光譜SP ELISAKitLAM人脂阿拉伯甘露聚糖規(guī)格：48T/96T

偶氮胂Ⅰ水合物(90%)  Arsenazo I Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：0.9 小鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 ，英文名： LFA-3/CD58 ELISA Kit

無水硫酸鈉(SP)   sulfate anhydrous  質(zhì)量規(guī)格：SP 大鼠雌激素(E)ELISA檢測試劑盒Ratesogen,EELISAKit 96T/48T

二甲基砜(核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn)品)  Dimethyl sulfone  質(zhì)量規(guī)格：核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn)品 人低氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2)試劑盒 Human HIF-2 ELISA kit

1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品)  1,3-Propanediol  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit大鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  DHA  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ERK蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

二甲硝咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dimetridazole  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 MouseResistinELISA試劑盒小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

青V鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Penicillin V potassium salt  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)ELISA試劑盒 ，英文名： LFA2 ELISA Kit

2-NP-AOZ(標(biāo)準(zhǔn)品)  2-NP-AOZ  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA檢測試劑盒HumancathepsinD,cath-DELISAKit 96T/48T

磺胺醋酰(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sulfacetamide  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒 Rat platelet factor 3,PF-3 ELISA kit
DNA Marker(100～1500bp)細(xì)胞EPHB2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

組織EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

組織EPHA1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞EPHA1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))