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小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟

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  • 品牌 R&D/美國
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更新時間:2017-03-14 17:27:06瀏覽次數:286

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產品簡介

用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟的含量。

詳細介紹

小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。 
英文名稱:Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit   
規格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養上清:適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準 品組(個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。

鏈霉素-青霉素(100X)規格:100ml

亮綠糖培養基/Brilliant Green Lactose Medium飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗250克國產/進口

大鼠腮腺細胞*培養基100mL

色氨酸肉湯發酵管BR20支國產/進口

U-2 OS(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

游離生物素測定培養基/Free Biotin Assay Medium嬰兒食品和粉中游離生物素測定250克國產/進口

RKO-AS45-1(人結腸轉基因細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠關節軟骨細胞*培養基100mL

四號瓊脂基礎/四號瓊脂/NO.4 Agar Base霍亂弧菌選擇性分離培養250克國產/進口

HA(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2

SW 780(人膀胱移行細胞)5×106cells/瓶×2

QSG-7701(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2gersion

CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2

mRTEC, 小鼠腎小管上細胞gersion

RBE(人膽管細胞)5×106cells/瓶×2

IBRS-2(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2

CCD-1095Sk(人腺浸潤性導管旁膚細胞)5×106cells/瓶×2

F81(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腎小管上細胞*培養基100mL

BABL/C小鼠胚胎細胞英文名稱:BABL/C2

小鼠腸動脈內細胞*培養基100mL

Ampicillin(100mg/ml,1000X)規格:5*1ml

人視網膜微血管內細胞*培養基100mL

M-FC瓊脂/濾膜糞大腸菌瓊脂/M-FC Agar大腸桿菌群的濾膜法檢測250克國產/進口

人淋巴血管內細胞*培養基100mL

大腸菌群顯色培養基/Coliform Chromogenic Medium快速準確檢測大腸菌群,大腸菌群培養24小時,顯蘭色1升國產/進口JWH 018-d9 (solution) (500 ug)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-2,2,3,3,4,4,5,5,5-d9-methanone; AM678; JWH 018-d9 (solution)

Sildenafil Citrate (25 mg)5-[2-ethoxy-5-[(4-methyl-1-piperazinyl)sulfonyl]phenyl]-1,6-dihydro-1-methyl-3-propyl-2-hydroxy-1,2,3-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-one; Viagra

20-hydroxy Prostaglandin E2 (100 ug)9-oxo-11α,15S,20-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 20-hydroxy PGE2; 20-hydroxy Prostaglandin E2

Prostaglandin F2α 1,11-lactone (1 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, 1,11-lactone; PGF2α 1,11-lactone; Prostaglandin F2α 1,11-lactone

15(R)-15-methyl Prostaglandin F2α (10 mg)9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R)-15-methyl PGF2α; 15(R)-15-methyl Prostaglandin F2α

NBD-FTY720 phenoxy (hydrochloride) (500 ug)N-[2R-hydroxy-1R-(hydroxymethyl)-3E-heptadecenyl]-2-amino-2-[2-(4-octylphenyl)ethyl]-1,3-propanediol,monohydrochloride; NBD-FTY720 phenoxy (hydrochloride)

Prostaglandin K1 (1 mg)9,11-dioxo-15S-hydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; PGK1; Prostaglandin K1

Prostaglandin A2-d4 (500 ug)9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,10,13E-trien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; PGA2-d4|Medullin-d4; Prostaglandin A2-d4

5-OxoETE (25 ug)5-oxo-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 5-KETE; 5-OxoETE

13(R)-HODE (50 ug)13R-hydroxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(R)-HODE

小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒操作步驟Human Plasma (100 dtn)Human Plasma

8-Isoprostane Express EIA Antiserum (100 dtn)8-Isoprostane Express EIA Antiserum

20-羥基蛻皮激素 AChE 示蹤物(100 dtn)20-Hydroxyecdysone AChE Tracer

PPARγ FP Assay Ligand Control (1 ea)PPARγ FP Assay Ligand Control

Cell-Based Assay Verapamil (50 ul)Cell-Based Assay Verapamil

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