詳細介紹
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1245 |
名稱 骨髓樹突狀細胞(DC細胞)
2.組織來源:骨髓
3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
人骨髓樹突狀細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;DC細胞,全稱樹突狀細胞(DC),是近年來倍受們關注的專職抗原呈遞細胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動T細胞介導的免疫反應。由美國學者Steinman于1973年在淋巴結中發現,從脾臟中分離出一類與粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞形態和功都不同的白細胞,因其細胞膜向外伸出,形成與神經細胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細胞。未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細胞,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的人骨髓DC細胞采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
公司實驗室分離的人骨髓樹突狀細胞(DC細胞)經CD86免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態 樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
沙保羅瓊脂平板90mm 青春雙歧桿菌
臭曲霉 Marivitalitorea 模式菌株
委內瑞拉鏈霉菌 Gramellaportivictoriae 模式菌株
赭綠青霉 Gramellaportivictoriae 模式菌株
洛格酵母 孢囊桿菌
雞β內酰胺酶(β-lactamase)elisa分析檢測試劑盒
雞β干擾素(IFN-β/IFNB)elisa分析檢測試劑盒
雞α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)elisa分析檢測試劑盒
雞α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa分析檢測試劑盒
雞α干擾素(IFN-α)elisa分析檢測試劑盒
骨髓樹突狀細胞(DC細胞)兔白介素-5(IL-5)elisa分析檢測試劑盒
兔白介素-5(IL-5)elisa檢測試劑盒免費代測
兔白介素6(IL-6)elisa檢測試劑盒
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