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小鼠胸腺淋巴細(xì)胞

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更新時(shí)間:2022-04-13 11:59:22瀏覽次數(shù):255

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X1269 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
小鼠胸腺淋巴細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品多囊腎蛋白1樣3抗體 Ras樣蛋白A+B抗體
0酸肌醇相互作用蛋白抗體 Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體
0酸化蛋白C/p-PKC ε抗體 RAS相關(guān)抑細(xì)胞生長(zhǎng)蛋白1抗體
嘌呤核苷0酸化酶抗體 Ras相關(guān)區(qū)域家族蛋白4抗體
浦肯野細(xì)胞相關(guān)蛋白1抗體 Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

圖片13.jpg

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

小鼠胸腺淋巴細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X1269

名稱    小鼠胸腺淋巴細(xì)胞
2.組織來(lái)源:胸腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠胸腺淋巴細(xì)胞分離自胸腺組織;胸腺是機(jī)體的重要淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具內(nèi)分泌機(jī)能的器官。位于胸腔前縱隔。胚胎后期及初生時(shí),是一生中重量相對(duì)大的時(shí)期。隨年齡增長(zhǎng),胸腺繼續(xù)發(fā)育;此后胸腺逐漸退化,淋巴細(xì)胞減少,脂肪組織增多。胸腺的結(jié)構(gòu)表面有結(jié)締組織被膜,結(jié)締組織伸入胸腺實(shí)質(zhì)把胸腺分成許多不*分隔的小葉。小葉周邊為皮質(zhì),深部為髓質(zhì)。皮質(zhì)不*包圍髓質(zhì),相鄰小葉髓質(zhì)彼此銜接。皮質(zhì)主要由淋巴細(xì)胞和上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)狀細(xì)胞間有密集的淋巴細(xì)胞。胸腺的淋巴細(xì)胞又稱為胸腺細(xì)胞,在皮質(zhì)淺層細(xì)胞較大,為較原始的淋巴細(xì)胞。中層為中等大小的淋巴細(xì)胞,深層為小淋巴細(xì)胞。從淺層到深層為造血干細(xì)胞增殖分化為小淋巴細(xì)胞的過(guò)程。皮質(zhì)內(nèi)還有巨噬細(xì)胞,無(wú)淋巴小結(jié)。髓質(zhì)中淋巴細(xì)胞少而稀疏,上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞多而顯著。形態(tài)多樣,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu),為其分泌物,尚有散在的圓形的胸腺小體。

5.方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胸腺淋巴細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胸腺淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體

趨化素樣因子超家族成員3抗體

染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體

冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體

細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1抗體
鹿尿酸氧化酶elisa檢測(cè)試劑盒

鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa檢測(cè)試劑盒

鹿免疫球蛋白A(IgA)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

鹿氧化酶(XOD)elisa檢測(cè)試劑盒

鹿(cAMP)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠胸腺淋巴細(xì)胞蜥蜴25羥基(25-OHC)elisa檢測(cè)試劑盒

蜥蜴elisa分析檢測(cè)試劑盒

蜥蜴elisa檢測(cè)試劑盒

蜥蜴雌二醇(E2)elisa分析檢測(cè)試劑盒

蜥蜴雌二醇(E2)elisa檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大小;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2
PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5
PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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