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小鼠腸神經嵴干細胞

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  • 型號
  • 品牌 R&D/美國
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更新時間:2022-04-13 13:44:47瀏覽次數:250

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X1317 應用領域 化工
主要用途 僅供科研使用    
小鼠腸神經嵴干細胞公司其它各種產品大鼠中性粒細胞趨化因子-1(CINC-1)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子樣細胞凋亡弱誘導因子
大鼠轉化生長因子α TGFα elisa檢測試劑盒
大鼠轉鐵蛋白 TRF elisa檢測試劑盒

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

圖片13.jpg

產品屬性:

產品名稱

小鼠腸神經嵴干細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

貨號

GOY-01X1317

名稱    小鼠腸神經嵴干細胞
2.組織來源:腸組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠腸神經嵴干細胞分離腸組織;神經嵴干細胞(neural crest stem cellsNCSC),即外周神經系統干細胞,起源于胚胎期的神經管背側,與中樞神經系統干細胞在形態學上有著顯著不同,NCSC可表達低親和力神經營養因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質細胞,而中樞神經系統干細胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織,如神經元、神經膠質、黑色素細胞、內分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等,其中可特異性分化出腸神經系統中神經元和神經膠質的NCSC,被稱為腸神經嵴干細胞(gut neural crest stem cellsGNCSC)。

5.方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞采用中性-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

公司實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基 B-27 SupplementEGFbFGFPenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態 球形

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1.
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensissubsp.galleriae   產紫青霉

假芝   棒狀桿菌

屎腸球菌(屎鏈球菌)   英諾克李斯特菌

異型酒香酵母   冬蟲夏草

雪白根霉   蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)
犬多肽YY(PYY)elisa分析檢測試劑盒

犬膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)elisa分析檢測試劑盒

犬催乳素(PRL/LTH)elisa分析檢測試劑盒

犬促腎上腺皮質激素(ACTH)elisa分析檢測試劑盒

犬促腎上皮質激素釋放激素(CRH)elisa分析檢測試劑盒
小鼠腸神經嵴干細胞小鼠R-脊椎蛋白1(RSPO1)elisa檢測試劑盒

小鼠R-型電壓依賴鈣離子通道α1E亞基(CACNα1E)elisa檢測試劑盒

小鼠S100-B蛋白(S100B)elisa分析檢測試劑盒

小鼠S100B蛋白(S100B)elisa檢測試劑盒

小鼠S100-B蛋白(S100B)elisa檢測試劑盒
實驗報告:
產品僅用于科研一、分離與培養:
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大小;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37 5CO2 培養箱中培養;
5
、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2
PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5
PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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