詳細(xì)介紹
我司全程提供細(xì)胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1419 |
名稱 大鼠浦肯野細(xì)胞
2.組織來源:小腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
大鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織;小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),叫小腦皮質(zhì),小腦皮質(zhì)分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞(Purkinje cell)是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬個浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),傳導(dǎo)速度快,可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,具有舒張期自動除極化的性能,因而有自律性,但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞。這類細(xì)胞常常平行排列,細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。小腦:浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中大的神經(jīng)元,細(xì)胞體呈梨形,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突,向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂,形如展開的、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘,與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部(與主樹突相對方向)發(fā)出,細(xì)長,離開胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個終末膨大,約與小腦深部核團(tuán)的35個神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,幾個細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個小束,小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網(wǎng),細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無橫管系統(tǒng),但膜電容比收縮細(xì)胞大,可能是由于其閏盤結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠浦肯野細(xì)胞采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶
6.質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠浦肯野細(xì)胞經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含脂質(zhì)濃縮液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
使用方法:
收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體
錨蛋白重復(fù)域5抗體
腦通道蛋白2抗體
腦通道蛋白4抗體
小腸通道蛋白5抗體
人β淀粉狀蛋白A4 elisa檢測試劑盒
人β-淀粉樣前體蛋白(β-APP)elisa檢測試劑盒
人β淀粉樣多肽42(Aβ 42)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
人β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)elisa檢測試劑盒
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa檢測試劑盒
大鼠浦肯野細(xì)胞小鼠兒茶酚抑素(CAT)elisa檢測試劑盒
小鼠兒茶酚抑素elisa分析檢測試劑盒
小鼠兒茶酚抑素elisa檢測試劑盒
小鼠二胺氧化酶(DAO)elisa分析檢測試劑盒
小鼠二胺氧化酶(DAO)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。