詳細介紹
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次*產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
產品介紹:
規格及成分:
Horikoshi-1 medium with 10% nacl
Magnetospirillum medium
Methanobacterium espanolae medium
Methyloferula slata
Modified medium 92
Oceanirhabdus medium
Pseudoalteromonas spiralis medium
Rhodovulum kholense medium
Spirochaeta caldaria medium
Syntrophobotulus medium
Thermosphaera medium
Trichococcus medium
YPS medium
大腸桿菌HB2151菌種
農桿菌GV3101菌種
B16F10細胞株
Chang liver[Changliver]細胞株HCC94(人子宮鱗細胞(高分化))5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
根瘤菌 Rhizobium sp.
大鼠肺動脈成纖維細胞*培養基100mL
球毛殼 Chaetomium globosum
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Tca-8113(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
猴菌
蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner
小鼠胰腺星狀細胞*培養基100mL
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
香菇 Lentinula edodes
786-O [786-0], 人腎透腺細胞
黑曲霉 Aspergillus niger
HCC827細胞株
JK(Jurkat)細胞株