詳細介紹
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL特點使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL特點產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL特點產品介紹:
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL特點規格及成分:
大提柱式細菌DNAout(含溶菌酶)
柱式腐殖酸清除劑(30次)
柱式軟體動物DNAout
一管式病毒DNA-RNAout
酸洗玻璃珠系列
一管式植物DNAout(500次)
柱式無內毒素質粒DNAout
天恩澤超電泳液(含染料)(見關聯產品)
天凈沙核酸濃縮劑
填入法DNA末端標記試劑盒(C)
DNA修復混合液(30次)細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒規格:500次
大鼠腸靜脈內皮細胞*培養基100mL
鼠傷寒沙門氏菌 Salmonella typhimurium
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NCI-H661(人大細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
淡青鏈霉菌 Streptomyces glaucescens
人回盲腸細胞英文名稱:HCT-8
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
SK-Hep-1(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌
UM-UC-3(人膀胱移行細胞)5×106cells/瓶×2
6nt 隨機引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL特點一步式RT-PCR Mix
可保種型藍白T載體
釀酒酵母AH109感受態細胞
即用型藍白T載體E型(無RNA啟動子,無MCS)
大腸桿菌XL2-Blue感受態細胞