詳細介紹
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次實驗步驟產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次實驗步驟產品介紹:
規格及成分:
使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
L-丙氨酸
α-淀粉酶
對氨基苯磺酸
甲醇
氯吡苯脲
葡聚糖凝膠G-50 中顆粒
脫落酸
乙酰丁香酮
Bismarck brown Y(俾氏麥棕Y)
多聚賴氨酸包被液
乙酸溶液,1.0%(v/v)費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
NCI-H292(人肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
假絲酵母 Candida sp.
小鼠腺腫瘤細胞英文名稱:C127
大鼠前脂肪細胞*培養基100mL
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
MA-891(小鼠腺高轉移細胞)5×106cells/瓶×2
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
佛羅里達側耳 Pleurotus florida
小鼠肥大細胞細胞英文名稱:P815
人腦成纖維細胞*培養基100mL
熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
嗜熱脂肪芽胞桿菌 Bacillus thermophilus
HL-60/急性髓性白血病細胞株國產
中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis
香菇 Lentinula edodes
人永生化角質細胞英文名稱:Hacat
多聚甲醛(0.1M 磷酸緩沖液,pH7.4)溶液,1%
Miller染液(Miller's Solution)
Nagar-Olsen 染色法肌肉組織染色試劑盒
Powers-Clark 染色法神經組織染色試劑盒
堿性重氮反應法特殊細胞染色試劑盒
蘇丹B與核固紅復合染色法脂類物質染色試劑盒
Leder-Stutt改良荼盼AS-TR 磷酸酯法酸性磷酸酶顯示試劑盒
Wade的FiteⅠ抗酸法的改良抗酸桿菌染色試劑盒
Bicarbonate Buffer(碳酸氫鹽緩沖液),1M,pH9.0
Casein Blocking Buffer in PBS(酪蛋白封堵劑)