詳細介紹
即用型長片段 PCR 試劑盒20 次實驗步驟產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
即用型長片段 PCR 試劑盒20 次實驗步驟產品介紹:
規格及成分:
使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
對硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷
甲醇(HPLC色譜)
氯化銨T
葡聚糖凝膠G-75中顆粒
脫氧膽酸
乙酰輔酶A
Bordeaux red(波爾多紅)
鉻礬明膠包被液
乙酸溶液,5.0%(v/v)天狼星紅染色試劑盒規格:200ml
大鼠食管上皮細胞*培養基100mL
樹狀假絲酵母 Candida cerevisiae
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2gersion
蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kenyae
CNE1, 人鼻咽細胞系
屎腸球菌 Enterococcus faecium
香菇 Lentinula edodes
CoC1(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
吉丹鏈霉菌 Streptomyces gedanensis
人胚肺成纖維細胞英文名稱:HELF
MN-h, 小鼠海馬神經元
粘紅酵母 Rhodotorula glutinis
鏈霉菌 Streptomyces sp.
Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒規格:50次
多聚甲醛(0.1M 磷酸緩沖液,pH7.4)溶液,4%
Oeth鋰胭脂紅染色液
Perdran 染色法網狀纖維染色試劑盒
Ramony-Cajal的三種染色法神經組織染色試劑盒
硫堇染色法特殊細胞染色試劑盒
天青A異染性染色法粘多糖染色試劑盒
Lojda-Fric偶聯法非特異脂酶顯色試劑盒