詳細介紹
斑馬魚尾鰭細胞;AB.9說明書【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 斑馬魚尾鰭細胞;AB.9說明書
形態特性
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件
傳代方法
傳代情況39
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
大豆慢生根瘤菌
人結直腸腺細胞英文名稱:Caco-2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
固囊酵母 Trichoderma longibrachiatum
蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani
小鼠氣管平滑肌細胞*培養基100mL
香菇 Lentinula edodes
香菇 Lentinula edodes
30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1)200ml國產
藤倉赤霉 Gibberella fujikuroi
苜蓿中華根瘤菌
rCSC, 大鼠心肌細胞gersion
屎腸球菌 Enterococcus faecium
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人臍靜脈血管內皮細胞英文名稱:HUVEC
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
小鼠軟骨細胞*培養基100mL
威爾酵母 Saccharomyces willianus
香菇 Lentinula edodes
Bacterial Protein Extration Kit/細菌蛋白抽提試劑盒25次、100次國產
粉擬青霉 Paecilomyces farinosus
人黑色素瘤細胞英文名稱:M14N6-Cbz-L-Lysine benzyl ester hydrochloride Nε-CBZ-L-賴氨酸芐酯酸 6366-70-7
4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic anhydride 六二酐 1107-00-2
2-CYANOETHYLTRICHLOROSILANE 三-2-碳硅烷 1071-22-3
2,2'-AZOBIS[2-(2-IMIDAZOLIN-2-YL)PROPANE] 偶氮二咪唑啉基丙烷 20858-12-2
phellodendrine 黃柏 6873-13-8
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside 5-溴-4-3吲哚基β-D 半乳糖 7240-90-6
alpha-Asarone α-細腦 2883-98-9
TRIS[4-(PERFLUOROOCTYL)PHENYL]PHOSPHINE 三[4-(十七基)基]磷化氫 284472-92-0
(SP-4-2)-((2E,7R,11R)-3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecenyl (3S,4S,21R)-9-ethenyl-14-ethyl-13-formyl-21-(methoxycarbonyl)-4,8,18-trimethyl-20-oxo-3-phorbinepropanoato(2-)-N23,N24,N25,N26]-magnesium 葉綠素 B 519-62-0
Gomisin A 五味子醇 58546-54-6
AZOMETHINE H 亞胺-H 32266-60-7
Ethoxyethyne 乙氧基乙炔 927-80-0
Zinc iodide 碘化鋅 10139-47-6
2-Amino-3,5-dinitrothiophene 2-氨基-3,5-二基噻吩 2045-70-7
Astragaloside III 黃芪皂苷 III 84687-42-3
Iodopropynyl butylcarbamate 丁基氨基酸碘代酯 55406-53-6
NA 10X分子篩
FLUOROTRIBROMOMETHANE 三溴烷 353-54-8