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非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 Vero-HCV-NS2細胞整合有丙型肝炎病毒的NS2基因,能穩定表達NS2蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
CHO(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小單孢菌 Micromonospora sp.
人尿道上皮細胞*培養基100mL
RSC, 大鼠雪旺細胞
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
蠟蚧輪枝菌 Verticillum lecanii
AllIP/Co-IP Kit(Rabbit/Human/Rat)通用型免疫沉淀試劑盒(兔/人/大鼠)50次試劑盒
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
金龜子綠僵菌小孢變種 Metarhizium anisopliae var. anisopliae
人肺腺細胞英文名稱:NCI-H1395
MGC80-3(MGC-803)人胃細胞 Human
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2
熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
紫色鏈霉菌 Streptomyces violaceus
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞英文名稱:DH82
細胞名稱 種屬
凝結芽孢桿菌 Bacillus coagulans
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna20只/袋 口腔拭子 ( 醫用簡裝 )
7次 克必隆 eTS 細基因組差減雜交試劑盒
T7 RNA 聚合酶 120310-25000 25000U
填入法 DNA 末端標記試劑盒 A 120653A-5 5次
250mL TAE 電泳液 ,50×
100 次 低載量 PCR 片段純化試劑盒
50 次 低載量 PCR 片段純化試劑盒
100μL 小鼠抗 HPC4 標簽蛋白單抗
溶酶溶液,10mg/mL 100815-1.5 1.5mL
即用型 PCR 試劑盒 2.0 70802-9 9 mL
100mL 吐溫 -20
25μL Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM
2mg 亮抑酶肽
50 次 柱式分枝桿 RNAout
過硫酸銨 CAS7727-54-0 25g
常用PCR引物 30-100 100uL
25mg 先鋒
100 次 古細 + 真細種屬鑒定 PCR Mix 3
5g 3- 苯甲酰丙酸
100mL Oligo(dT) 再生溶液
小牛胸 DNA CAS73049-39-5 50mg