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非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價格

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  • 廠商性質 經銷商
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更新時間:2017-01-23 14:58:09瀏覽次數:356

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產品簡介

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價格售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱
形態特性  上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  Vero-HCV-NS5A細胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能穩定表達NS5A蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

曲霉屬 Aspergillus sp.
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
DLD-1(人結腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
莢膜放線桿菌 Actinobacillus capsulatus
EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復液, 50x)100ml國產
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
燼灰吸水鏈霉菌 Streptomyces cinereohygroscopicus
倉鼠腎成纖維細胞英文名稱:BHK-21 [C-13]
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
側耳 Pleurotus sp.
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒規格:50次
293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
LLC-MK2(恒河猴腎細胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
梭形芽胞桿菌 Bacillus fusiformis
HCG803全細胞裂解液100ug100ug
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)    120668E-1    1個
25mL    四甲基乙二胺    
5次    大提柱式動物 RNAout    
100g    瓊脂糖    
500U    堿性磷酸酶,偶聯    
PvuII    17-0190    1000U
暗盒 (5×7 英寸 )    120609A-1    1個
5g    苔素    
1g    多聚半乳糖醛    
25 次    動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    
200U    Dicer(RNase III)    
Western 雜交技術服務    P002-1    1 張膜
UTP 溶液,2.5mM    131217-2    2mL
2mL    無包被磁珠    
1mL    GS115 酵母種    
25mg    可溶性兩性 B    
2mL    dGTP 溶液,2.5mM    
纖維二糖    CAS528-50-7    5g
Rosetta 感受態細胞    140379-10    10×100μL
200mL    小鼠中性粒細胞分離液 1.100    
100 次    海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒    

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