詳細介紹
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7*直銷操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7*直銷現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞株源自CV-1細胞株,經轉染起始點缺失的SV40病毒突變體得到;編碼表達野生型T抗原,所以該細胞適合作為需要SV40 T抗原表達的載體的轉染宿主。該細胞表達T抗原,允許SV40病毒的溶解性生長,支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復制,支持起始區域缺陷的SV40突變體的復制。因含有SV40病毒的DNA序列,該細胞需要在2級生物安全柜中操作。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 51-129
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
GNM(人口腔鱗頸淋巴結轉移細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
RWPE1(人前列腺上皮細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner
小鼠胰腺導管上皮細胞*培養基100mL
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
香菇 Lentinula edodes
786-O(人腎透細胞細胞)5×106cells/瓶×2
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
苜蓿中華根瘤菌
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2
圣堡羅沙門氏菌 Salmonella saintpaul
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人前列腺上皮細胞*培養基100mL
人絨毛膜間充質基質細胞 Human
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus4次 大提柱式細 DNAout
500U 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶
溴酚藍 CAS115-39-9 5g
Y2HGold 酵母種 12-194 1mL
20 次 一站式 His 標記蛋白質微量純化套裝
10 次 克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒
250mg 直鏈淀粉
100mL PRMI1640 培養基 ( 含 10% 胎牛血清 )
100g DNA CTAB( 十六烷基*基溴化銨 )
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC·7-AAD) 140625-20 20 次
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ 90602H-50 50 次
100g 十二烷基硫酸
100mL 動物 DNAout
1g 6- 芐基氨基嘌呤
0.5mL 鏈霉親和素,AP 標記
L-(+) 乳酸鋰鹽 CAS27848-80-2 5g
E-64 蛋白酶抑制劑,20mg/mL 130541-10 10mL
50 次 柱式昆蟲 DNAout
100mg Monensin ( 蛋白轉運抑制劑 )
200 次 ATP 發光法細胞活力檢測試劑盒
250mL 動物 DNAout
10mL DNA 稀釋液
蝦堿性磷酸酶 120403-300 300U