詳細介紹
人乳腺癌細胞(穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒);MDA-MB-231-B2*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人乳腺癌細胞(穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒);MDA-MB-231-B2*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pTet-on質(zhì)粒,表達rtTA、Neo,受Dox誘導倍數(shù)為20。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS + 400ug/ml G418
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:13;D16S539:12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:20,21;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:22,23;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
柱式動物線粒體 DNAout,PCR 50 次
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒10 次
90502-200AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶200U
90603A-5隨機引物法 DNA 探針標記試劑盒5次
T4 噬菌體基因 32 蛋白100μg
蛋白質(zhì)電泳分子量標準 (14.4-97.4KD)20 次
離心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只
小鼠 RFP 標簽單抗1000μL
130873-300TEV 蛋白酶300U
131140-40雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4
透明質(zhì)酸100mg
F12 培養(yǎng)基100mL
硼酸500g
低熔點瓊脂糖5g
CAS9031-72-5 乙醇脫氫酶1.5ku
131130E-100真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
細胞株系列--
高效農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞制備試劑盒20 次Acetylpyrazine2-乙酰基吡嗪22047-25-2
2-Methylindoline2-基吲哚啉6872/6/6
FREUND'S COMPLETE ADJUVANT弗氏*佐劑9007-81-2
Xanthone占噸90-47-1
Fmoc-N-methyl-L-isoleucineFmoc-N-基-L-異亮氨酸138775-22-1
1-TRIDECA-十三醇112-70-9
2,4-DIBROMO-6-(TRIFLUOROMETHYL)ANILINE2-氨基-3,5-二溴三71757-14-7
3-METHYLINDAN-1-ONE3-基-1-茚6072-57-7
3,3'-DIFLUOROBENZOPHENONE3,3'-二二345-70-0
Spermine精胺71-44-3
tert-Butylisocyanate叔丁基異酸酯1609-86-5
2-(4-Bromophenyl)ethylamine4-溴乙胺73918-56-6
DECAMETHYLTETRASILOXANE十基四硅氧烷141-62-8
Notoginsenoside Ft1三七皂苷Ft1
L-HomoserineL-高絲氨酸672-15-1
2,3,5,6-TETRAMETHYL-1,4-PHENYLENEDIAMINE四基對3102-87-2
3-(ACRYLOYLOXY)PROPYLTRIMETHOXYSILANE3-丙氧丙基三氧基硅4369-14-6
Tetradecylthioacetic acid十四烷基硫代乙酸2921-20-2
griffonin紫草苷63492-69-3
Cyclopropanecarbonitrile環(huán)丙基5500-21-0
γ- 環(huán)狀糊精25mg
預混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g
CAS538-75-0N,N,- 二環(huán)已基碳化二亞胺25g
12-157JM109 菌種1mL