詳細介紹
人乳腺癌細胞(綠色熒光蛋白標記);MDA-MB-231-GFP價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人乳腺癌細胞(綠色熒光蛋白標記);MDA-MB-231-GFP價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 GFP穩(wěn)定表達
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS;200ug/ml G418
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:13;D16S539:12;D18S51:11,16;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2;D2S1338:20,21;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:22,23;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
氯化金1g
超雜交液 ( 芯片 )10mL
CAS4800-94-6羧芐青霉素1g
140374-10DH10B 感受態(tài)細胞0.1 mL×10
小鼠抗 Trx 標簽蛋白單抗 100 μL
HRP 標記的兔抗 GST 標簽多抗20μL
γ- 球蛋白 ( 牛血 )1g
骨骼肌細胞生長因子5mL
DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 )100g
140631-50雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD)50 次
120654F-20Southern Marker Oligo(DIG)20 次
石榴紅硫酸鹽1g
動物細胞裂解液 A50mL
茜素紅 S25g
胰蛋白酶,質譜100μg
CAS9001-64-3蘋果酸脫氫酶5ku
130545-10膦酰二肽溶液,10mg/mL10mL
柱式葡萄球菌 RNAout50 次
馬來酸10g
ATP 溶液,2.5mM2mLPONCEAU 6R麗春紅6R5850-44-2
1-Acetyl-4-piperidinecarboxylic acid1-乙酰基-4-啶酸25503-90-6
2,6-DIMETHYLHYDROQUINONE2,6-二基-1,4-二酚654-42-2
ZIRCONIUM鋯粉7440-67-7
Cinnamyl chloride肉桂基2687/12/9
Guanosine 5'-monophosphate disodium salt5'-鳥苷酸二5550/12/9
Calcium borate偏酸鈣13701-64-9
1-(3-Chloropropyl)-4-methylpiperazine dihydrochloride1-(3-丙基)-4-基嗪二酸2031-23-4
Dropropizine羥丙嗪17692-31-8
alpha,alpha,alpha-Trifluoro-o-toluoyl chloride4-三基酰329-15-7
NA9,10-二(對乙氧基)基蒽(ETHOX)
Cyclobutanone環(huán)丁1191-95-3
Mordant Black 3鉻藍B3564-14-5
Dimeric mercapto propanone二聚巰基丙55704-78-4
DUROQUINONE四基對醌527-17-3
Pentaerythritol tris[3-(1-aziridinyl)propionate]季四醇-三(3-氮丙啶基)丙酸酯57116-45-7
2-Tridecanone2-十三烷593-08-8
CALMAGITE鈣鎂試劑3147-14-6
Tetraethylammonium hydroxide四乙基氫氧化銨77-98-5
ZHUCENGCENGXIGUIJIAO柱層層析硅膠
(4-Hydroxy-2-methyl)phenylboronic acid4-羥基-2-基酸493035-82-8
DNA 上樣液 ( 藍 ),6×10mL
INVSc1 酵母菌種1mL
60609-1000T4 DNA 連接酶1000U
130609-1一步式 RT-PCR Mix 1mL
WST-1 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒100 次