詳細(xì)介紹
人卵巢癌細(xì)胞;Caov-4圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人卵巢癌細(xì)胞;Caov-4圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞源自一位45歲卵巢腺癌女性患者的漿膜下的輸卵管。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 20%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代,每周換液2~3次
傳代情況 P39
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:12,14;D16S539:9,11;D18S51:21;D19S433:11,12;D21S11:28,33.2;D2S1338:17,20;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,10;D8S1179:12;FGA:22;TH01:6,9.3;TPOX:8,9;vWA:16,17;
同工酶
染色體 亞三倍體,超四倍體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
痰液 DNAout50 次
多聚甲醛25g
即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次
通用 miRNA 克隆接頭0.83nmol
P003-1免疫共沉淀技術(shù)服務(wù)一個(gè)蛋白
120628-0.25GTP 溶液,100mM0.25mL
無(wú)機(jī)焦磷酸酶 ( 酵母 )10U
GS190 酵母菌種1mL
幾丁質(zhì)10g
dCTP 溶液,2.5mM2mL
CAS9012-54-8纖維素酶1g
140645-10TB1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
小鼠腫瘤細(xì)胞分離液 1.070200mL
海藻糖溶液,1.5M,PCR 1.5mL
異硫氰酸熒光素50mg
n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷1g(S)-(-)-4-Bromo-alpha-phenylethylamine(S)-(-)-1-(4-溴)乙胺27298-97-1
NA732樹(shù)脂/717樹(shù)脂
4-AMINOBENZOPHENONE4-氨基二1137-41-3
FAST BLACK K SALT PRACTICAL GRADE固K27766-47-8
4-(Trifluoromethyl)benzyl alcohol4-(三基)芐醇349-95-1
TETRAHYDROXY-P-BENZOQUINONE DIHYDRATE四羥基-對(duì)-醌,二水5676-48-2
3-Lauryloxypropyl-1-amine3-十二烷氧基丙胺7617-74-5
2-Chlorophenyl cyclopentyl ketone鄰基環(huán)基6740-85-8
Fmoc-L-aspartic acidFmoc-L-天冬氨酸119062-05-4
Tetrabutylammonium hydroxide四丁基氫氧化銨溶液2052-49-5
Acetylaconitine乙酰烏頭77181-26-1
4-(2-Tetrahydropyranyloxy)phenylboronic acid4-四氫吡喃酸182281-01-2
TRIGONELLINE葫蘆巴535-83-1
GLYCYL-DL-LEUCINE甘氨酸-DL-亮氨酸688-14-2
NA紫尿酸銨
Triisopropylsilyl chloride三異丙基硅烷13154-24-0
Tropine-3-thiol hydrochloride托品-3-硫醇酸908266-48-8
Ononin芒柄花苷486-62-4
2-THENOYLACETONITRILE2-噻吩基乙酰33898-90-7
5-Cyanophthalide5-基酞82104-74-3
(BROMOMETHYL)TRIPHENYLPHOSPHONIUM BROMIDE(溴基)三基溴化鏻1034-49-7
SUCCINYL COENZYME A SODIUM SALT琥珀酰輔酶A108347-97-3
SCHIZANDRIN B五味子乙素61281-37-6
CAS38099-82-0D- 果糖 -1,6- 二磷酸鹽100mg
80909-1.5IPTG 溶液,200mg/mL1.5mL
一站式磁珠法動(dòng)物 mRNAout50 次
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶500U
環(huán)孢霉素 A5mg