詳細介紹
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
艾格瓊脂/Eugonic Agar過程中無菌監測250克國產/進口
人低分化前胃細胞英文名稱:BGC-823
結核冷染液70毫升×3國產/進口
大鼠心肌成纖維細胞*培養基100mL
七葉苷培養基/Esculin Medium生化實驗培養基,用于細菌七葉苷水解試驗250克國產/進口
倉鼠腎成纖維細胞英文名稱:BHK-21 [C-13]
亞硫酸鐵瓊脂/Sulfite Iron Agar用于厭氧亞硫酸鹽還原桿菌的平板計數250克國產/進口
SiHa(人子宮頸鱗細胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2YC-1 (10 mg)5-[1-(phenylmethyl)-1H-indazol-3-yl]-2-furanmethanol; YC-1
Sulpho NONOate (25 mg)disodium (E)-1-sulfonatodiazen-1-ium-1,2-diolate; Sulpho NONOate
Carbaprostacyclin methyl ester (500 ug)6,9α-methylene-11α,15S-dihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; Carbaprostacyclin methyl ester
S-Adenosylhomocysteine-d4 (500 ug)S-(5’-deoxyadenosin-5’-yl)-L-homocysteine-d4; SAH-d4; S-Adenosylhomocysteine-d4
Palmitoyl Serotonin (5 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-hexadec*; Palmitoyl Serotonin
3-Deazaadenosine (10 mg)1-β-D-ribofuranosyl-1H-Imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine; deaza-Ado|DZA|c3Ado; 3-Deazaadenosine
Vigabatrin (50 mg)4-amino-5-hexenoic acid; Sabril
JWH 398 6-chloronaphthyl isomer (5 mg)(6-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 398 6-chloronaphthyl isomer
JWH 210 5-ethylnaphthyl isomer (10 mg)(5-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 5-ethylnaphthyl isomer
bk-MDDMA (hydrochloride) (50 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(dimethylamino)-1-propanone, monohydrochloride; Dimethylone; bk-MDDMA (hydrochloride)
3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone (hydrochloride) (50 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-2-(benzylamino)propan-1-one, monohydrochloride; BMDP; 3,4-Methylenedioxy-N-benzylcathinone (hydrochloride)
Eicosapentaenoic Acid (peroxide free) (250 mg)5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; EPA (peroxide free)|Timnodonic Acid (peroxide free); Eicosapentaenoic Acid (peroxide free)
Olvanil (50 mg)N-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-9Z-octadecenamide; N-Vanillyloleamide|NE 1955Olvanil
5(S),6(R)-Lipoxin A4 (25 ug)5S,6R,15S-trihydroxy-7E,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R),15(S)-TriHETE|5(S),6(R)-LXA4; 5(S),6(R)-Lipoxin A4
Apocynin (5 g)1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-ethanone; Acetovanillone|Acetoguaiacone|NSC 2146|NSC 209524; Apocynin
Ni-Agarose Resin for 6x His-Tagged ProteinsNi瓊脂糖凝膠100ml國產gersion
BC-021(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
MA, 小鼠星形膠質細胞
IMR-32(人神經母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HEC-1A, 人子宮內膜細胞系
中國倉鼠肺細胞英文名稱:CHL