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EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0926圖片

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更新時間:2017-01-05 10:26:13瀏覽次數:578

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產品簡介

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0926圖片售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0926圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0926圖片
形態特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。 
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

小鼠腸動脈內細胞*培養基100mL
Ampicillin(100mg/ml,1000X)規格:5*1ml
人視網膜微血管內細胞*培養基100mL
M-FC瓊脂/濾膜糞大腸菌瓊脂/M-FC Agar大腸桿菌群的濾膜法檢測250克國產/進口
人淋巴血管內細胞*培養基100mL
大腸菌群顯色培養基/Coliform Chromogenic Medium快速準確檢測大腸菌群,大腸菌群培養24小時,顯蘭色1升國產/進口
貓腎上細胞英文名稱:CRFK
酪蛋白瓊脂/水解酪蛋白瓊脂/Casein Agar Medium用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗250克國產/進口
大鼠腎管狀上細胞*培養基100mL
糖蛋白胨培養液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發酵法檢驗250克國產/進口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養250克國產/進口
RN-c, 大鼠質神經元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細胞*培養基100mL抑肽素 APepstatin A
AP106AP106
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDa
15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard (5 mg)15-deoxy-Δ12,14-PGJ2, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard, 11-oxo-prosta-5Z,9,12E,14Z-tetraen-1-oic acid
8-iso-15-keto Prostaglandin F2β (5 mg)8-iso-15-keto Prostaglandin F2β, 9.beta.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
15-S)-HETE Ethanolamide (500 ug)15(S)-HAEA, 15-S)-HETE Ethanolamide, 15(S)-hydroxy-N-(2-hydroxyethyl)-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenamide
MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite, (1-(5-fluoro-4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methylnaphthalen-1-yl)methanone
15-keto Latanoprost (100 mg)15-keto Latanoprost, 9.alpha.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18,19,2-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester
D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate (sodium salt) (5 mg)Ins(1,3,4)-P3 (sodium salt)|1,3,4-IP3 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate, D-myo-inositol-1,3,4-tris(dihydrogen phosphate), trisodium salt
25I-NBOMe (hydrochloride) (5 mg)25I-NBOMe, 4-iodo-2,5-dimethoxy-N-[(2-methoxyphenyl)methyl]-benzeneethanamine, monohydrochloride
L-色氨酸(25GM)L-Tryptophan, CAS# 73-22-3; MW 204.23; USP
中國藍薔薇酸瓊脂250克國產/進口
Ca Ski(人宮頸上細胞)5×106cells/瓶×2
G1(發綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion

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