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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907圖片

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更新時(shí)間:2017-01-05 10:19:16瀏覽次數(shù):263

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱(chēng) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來(lái)源于一無(wú)精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

5-MAPB (hydrochloride) (10 mg)1-(benzofuran-5-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride; 5-(2-Methylaminopropyl)Benzofuran; 5-MAPB (hydrochloride)
5-methoxy-α-Ethyltryptamine (10 mg)α-ethyl-5-methoxy-1H-indole-3-ethanamine; 5-MeO-α-ET; 5-methoxy-α-Ethyltryptamine
JWH 146 (10 mg)(1-heptyl-5-phenyl-1H-pyrrol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 146
Gatifloxacin (10 g)1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-7-(3-methyl-1-piperazinyl)-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid; AM 1155|BMS 206584-01|PD 135432; Gatifloxacin
JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite (10 mg)(1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methoxynaphthalen-1-yl)methanone; JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite
5-(N-ethyl-N-isopropyl)-Amiloride (10 mg)3-amino-N-(aminoiminomethyl)-6-chloro-5-[ethyl(1-methylethyl)amino]-2-pyrazinecarboxamide; EPIA|L-593,754|MH 12-43; 5-(N-ethyl-N-isopropyl)-Amiloride
PJ-34 (hydrochloride) (1 mg)N-(5,6-dihydro-6-oxo-2-phenanthridinyl)-2-(dimethylamino)-acetamide, monohydrochloride; PJ-34 (hydrochloride)
JNJ-1661010 (25 mg)N-phenyl-4-(3-phenyl-1,2,4-thiadiazol-5-yl)-1-piperazinecarboxamide; JNJ-1661010Citrate Buffer(100x)/檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 100x)100ml國(guó)產(chǎn)
小鼠結(jié)締組織纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):LTK
786-O [786-0], 人腎透明腺細(xì)胞
人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞英文名稱(chēng):HEC-1-B
BGS瓊脂/BGS Agar沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人腺細(xì)胞英文名稱(chēng):MDA-MB-453
UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠角膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
DNA酶瓊脂/脫氧核糖核酸酶瓊脂/Dnase Agar用于細(xì)菌DNA酶檢測(cè)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
UVM培養(yǎng)基/UVM Medium李氏菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肺上細(xì)胞英文名稱(chēng):L132
煌綠糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠糖膽鹽增菌液/BGLB Broth用于水樣中大腸菌的檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Cooked Meat Medium Base用于厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
硝酸鹽氰化培養(yǎng)基基礎(chǔ)/KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Potassium Cyanide Medium Base用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
L-O2(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞gersion
PPADS (sodium salt) (10 mg)4-[2-[4-formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy)methyl]-2-pyridinyl]diazenyl]-1,3-benzenedisulfonic acid, tetrasodium salt; Pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2’,4’-disulfonic acid; PPADS (sodium salt)
Diazoxide (100 mg)7-chloro-3-methyl-1,1-dioxide-2H-1,2,4-benzothiadiazine; NSC 64198|NSC 76130|SRG 95213; Diazoxide

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